植物病原线虫的检验检测 (1).pptVIP

3.样品的处理 样品取回实验室后, 选取需要分离的样品, 首先将样品锯成 15~ 20cm 长, 少于 1cm厚的木条或木片, 将木条或木片放入塑料桶中, 加水浸过松材浸泡 6~ 24h。然后将松材浸出液倒进线虫分离套筛内过滤线虫, 其方法是 100目筛在上方, 400 目筛在下方, 用自来水冲洗上筛, 将筛上物冲洗到下筛, 取去上筛, 再用水小心地从筛旁和筛的后边把留在400目筛的筛内物冲洗到培养皿中, 将培养皿移至解剖镜( 立体镜) 下观察有无线虫。 过筛冲洗的筛内物, 可通过漏斗法除去杂质, 其方法是先在漏斗中铺上双层面巾纸,用止水夹夹住漏斗下方的胶管( 也可用小试管直接套在胶管中) , 将分离液体倒进漏斗里, 然后小心地从漏斗旁边把水加至漏斗 1/2 或 2/ 3 处( 应避免水流冲破面巾纸) , 静置6h 以上, 让线虫通过纸巾游动到下方的胶管里, 而杂质则隔离在纸巾上, 需要检验线虫时, 打开漏斗的止水夹, 取出适量的液体放进培养皿中, 移至解剖镜下检验, 此时液体中的杂质已经隔掉, 在解剖镜下就很容易找到线虫。采取同样方法, 在没有线虫分离套筛的情况下, 也可在塑料桶中浸泡了松材样品后,取出松材, 将浸出液静置 2h, 然后慢慢倒掉上层液体, 只留下桶底的液体, 把此液体移至漏斗中按以上方法过滤, 也可分离非常干净的线虫液体, 便于在解剖镜