DNA重组技术基本工具改版.pptVIP

基因工程又叫做 或 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 提取出来，加以 ， 然后放到另一种生物的细胞里， 改造生物的遗传性状。 专题1 基因工程 基因拼接技术 DNA重组技术 基因 修饰改造 定向地 第1节 问题探讨 手术刀 缝合针 运输工具 培育抗虫棉需要哪些基本工具? 分布 种类 特点 结果 “限制性核酸内切酶——分子手术刀” 自主学习 主要从原核生物中分离纯化而来 已经分离出大约4000种 1、识别某种特定核苷酸序列 2、使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 形成黏性末端或平末端 磷酸二酯键 　 黏性末端　　　　 黏性末端 EcoRI限制酶的切割 平末端　　　平末端 SmaI限制酶的切割 类型 来源 功能 相同 差别 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复 磷酸 二酯 键 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和 平末端(效率较低) “分子缝合针”——DNA连接酶 自主学习 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ DNA连接酶的缝合作用 A A T T G C A A T T A A T T DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶的作用 两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 将一个个核苷酸连接起来，形成磷酸二酯键 DNA聚合酶: DNA连接酶: 载体的作用 载体的 必要条件 载体的种类 自主学习 1)能自我复制 2)具多个限制酶切点 3)具有某些标记基因 4)必须是安全的 ,对受体细胞无害. 1）作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制 ①细菌的质粒 ②病毒：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因 本质:小型环状DNA分子 分布：许多细菌、 酵母菌等生物 最常用运载体——质粒 1、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 A 2．基因工程中可用作载体的是 ①质粒 ②噬菌体 ③病毒 ④动物细胞核 A．①②③ B．①②④ C．②③④ D．①③④ 3、下列说法正确的是：（ ） A、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、重组技术所用的工具酶是限制酶、 连接酶、运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆” D 4．下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是 A．①② B．①③ C．①④ D．②③ B 限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。 （1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。 （2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。 （3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？ 可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的） 小试身手 /wbdjjx 更多精彩尽在 谢谢观看 *