第七章微生物遗传变异育种.pptVIP

（2）移码突变 ?指诱变剂会使DNA序列中的一个或几个核甘酸发生增添（插入）或缺失,从而使该处后面的全部遗传密码的阅读框架发生改变,并进一步引起转录错误的一类突变. 原因:吖啶类染料及一系列ＩＣＲ类化合物． 移码突变图： (3)染色体畸变 ?1、染色体畸变： 引起DNA分子的大损伤染色体畸变， 包括染色体结构上的缺失、重复、插入、易位和倒位，也包括染色体数目的变化。 ２、转座和转座因子 转座：DNA序列通过非同源重组的方式，从染色体某一部位转移到同一染色体上另一部位或其他染色体上某一部位的现象，称为转座。 转座因子：凡具有转座作用的一段DNA序列，称转座因子 包括原核生物中的插入序列(is）、转座子（Tn)和E.coli的Mu噬菌体等转座噬菌体。 转座的过程及其中受体DNA中靶序列的复制过程 2.自发突变 自发突变:指生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变。 自发突变的原因有： ①由背景辐射和环境因素引起， ②由微生物自身有害代谢产物引起， ③由DNA复制过程中碱基配对错误引起。 (六）紫外线对DNA的损伤及其修复 ?1．光复活作用 把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下时，就可出现明显降低其死亡率的现象，此即光复活作用。 2.切除修复 切除修复: 是一种不依赖可见光、只通过酶切作用去除嘧啶二聚体,随后重新合成一段正常DNA链的核酸修复方式. 二、突变与育种 1．从生产中育种 正突变株:指生产性状优于原株的产量突变株 2.定向培育优良菌株 定向培育:是一种利用微生物的自发突变，并 采用特定的选择条件，通过对微生物群体不断移植以选育出较优良菌株的古老方法。 例如:卡介苗 （一）自发突变与育种 （二）诱变育种 ?诱变育种:是指利用物理、化学等诱变剂处理均匀而分散的微生物细胞群，采用简便、快速和高效的筛选方法，从中挑选出少数符合目的的突变株，以供使用。 1．诱变育种的基本环节 2.诱变育种中的几个原则 ?(1)选择简便有效的诱变剂 物理因素: A非电离辐射类的紫外线、激光和离子束等， B电离辐射的X射线、丫射线和快中子等； 化学诱变剂: 主要有烷化剂、碱基类似物和吖啶化合物 ?艾姆氏试验 原理： 　　鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型（his-）菌株在基本培养基[-]的平板上不能生长，如发生回复突变变成原养型（his＋）后则能生长。 方法大致是在含待测可疑“三致”物例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反应停” 或二口恶口英等的试样中，加入鼠肝匀浆液，经一段时间保温后，吸人滤纸片中，然后将滤纸片放置于上述平板中央。 经培养后，出现3种情况： ①在平板上无大量菌落产生，说明试样中不含诱变剂； ②在纸片周围有一抑制圈，其外周出现大量菌落，说明试样中有某种高浓度的诱变剂存在； ③在纸片周围长有大量菌落，说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。 艾姆斯试验法检测致癌物示意图 (2）挑选优良的出发菌株 ?用于育种的原始菌株， (3)处理单细胞或单孢子悬液 （4）选用最适的诱变剂量 (5)充分利用复合处理的协同效应 (6）利用和创造形态、生理与产量间的相关指标 (7)设计高效筛选方案 (8）创造新型筛选方法 3. 3类突变株的筛选方法 ?（1）产量突变株的筛选 (2)抗药性突变株的筛选 (3)营养缺陷型突变株的筛选 ?基本培养基（MM，符号为[-]）：仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需要的最低成分的组合培养基，称基本培养基。 完全培养基（CM,符号为[＋]）：凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基，称完全培养基。 补充培养基（SM ;符号为[A]或[B]等）：凡只能满足相应的营养缺陷型突变株生长需要的组合或半组合培养基，称补充培养基。 ①有关的3类培养基： ②与营养缺陷型突变有关的3类遗传型个体： ?野生型：指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷突变前的原始菌株。 营养缺陷型：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长，这类突变菌株称为营养缺陷型突变株，或简称营养缺陷型。 原养型：一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株，其营养要求在表型上与野生型相同，遗传型均用[A+ B+]表示 ③营养缺陷型的筛选方法： ?一般要经过诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型4个环节： 第一步，诱变剂处理： 第二步，淘汰野生型： 第三步，检出缺陷型 第四步，鉴定缺陷型 第三节基因重组和杂交育种 ?基因重组: 两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定