宫颈及宫颈癌间质成纤维细胞的分离鉴定与衰老检测-中国癌症杂志.pdf

中国癌症杂志 2014年第24卷第4期 《 》 258 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No.4 宫颈及宫颈癌间质成纤维细胞的分离、 鉴定与衰老检测研究 1 1 2,3 陈玮 　陈亚萍 　杨恭 1. 复旦大学附属上海市第五人民医院妇产科， 复旦大学上海医学院妇产科学系，上海 200240 ； 2. 复旦大学附属上海市第五人民医院中心实验室， 复旦大学上海医学院妇产科学系，上海 200240 ； 3. 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤研究所，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032 　　［摘要］　背景与目的： 宫颈癌作为最常见的妇科恶性肿瘤之一，近年来发病呈年轻化趋势。目前认为人 类乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)的感染，特别是高危型HPV感染是其发生的主要因素。已有研究证 实，在肿瘤发生的微环境中，间质成纤维细胞衰老可能促进上皮性肿瘤的发生，但宫颈癌的发生是否也伴有间 质成纤维细胞的衰老鲜见报道。本研究拟对正常宫颈和宫颈癌间质成纤维细胞进行特异性研究，以揭示慢性 炎症诱导宫颈癌发生的机制，旨在为宫颈癌的诊治提供新的理论依据。方法：分离纯化正常宫颈成纤维细胞 (normal fibroblasts NFs) (cancer-associated fibroblasts CAFs) ELISA ， 和宫颈癌相关成纤维细胞 ， ，通过 法检测细胞 6(interleukin-6 IL-6) (vascular endothelial growth factor VEGF) 因子白介素- ， 和血管内皮生长因子 ， 的分泌水平； - (senescence-associated β-galactosidase SA-β-gal) 并用衰老相关β 半乳糖甘酶染色 ， 、细胞计数和蛋白质印记法 (Western blot)分别鉴定细胞衰老、绘制细胞生长曲线和检测NFs与CAFs 中p16蛋白表达 。结果：CAFs分泌的细 IL-6 VEGF NFs 2 (P0.05) CAFs SA-β-gal NFs CAFs p16 胞因子 和 比 高 倍以上 ； 中 的活性比 高；而 中 水平的表达水平 NFs HPV 比 中高。结论：间质成纤维细胞衰老可能与宫颈癌的发生和 密切相关，研究细胞因子介导的宫颈癌间 质衰老可