低氧预处理YOU导骨髓间充质干细胞Pim-1激酶高表达抑制细胞凋亡.doc

www.CRTER www.CRTER.org www.CRTER www.CRTER.org 张优，等. 低氧预处理诱导骨髓间充质干细胞Pim-1激酶高表达抑制细胞凋亡 PAGE 1998 PAGE 3 P.O.Box 1200, PAGE 1989 低氧预处理诱导骨髓间充质干细胞Pim-1激酶高表达抑制细胞凋亡 文章快速阅读： 低氧预处理诱导骨髓间充质干细胞Pim-1激酶高表达抑制细胞凋亡 低氧预处理诱导骨髓间充质干细胞Pim-1激酶高表达抑制细胞凋亡 文题释义： 低氧预处理：低氧预处理能激活细胞内的一些保护机制，增强干细胞的抗凋亡和旁分泌功能，促进干细胞的存活和新生血管形成，从而进一步促进组织修复和功能恢复，提高干细胞移植效果，且无致肿瘤形成风险。 Pim-1：最早是作为莫洛尼小鼠白血病病毒的前病毒插入点而被发现，Pim家族还包括另外2个成员，即Pim-2和Pim-3，它们都包含一个被称为ATP锚的活化位点。Pim-1基因产物属于钙离子/钙调素依赖的蛋白激酶，并在多种细胞组织进化过程中高度保守。Pim-1基因在细胞增殖、分化、凋亡等许多生理病理中起重要作用，此外发现其在心肌梗死局部区域表达明显提高，抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡及心室重构。 摘要 背景：骨髓间充质干细胞移植入缺血心肌后存活率低，而低氧有可能增强骨髓间充质干细胞的增殖，促进其存活。 目的：探讨Pim-1激酶是否介导缺氧预处理对骨髓间充质干细胞的保护作用及其机制。 方法：设置不同低氧处理时间(0，6，12，24 h)处理骨髓间充质干细胞，RT-qPCR及Western blot检测 Pim-1及凋亡相关基因的表达，确定最佳低氧处理时间为12 h。将骨髓间充质干细胞分为3组：正常对照组、低氧组、低氧+Pim-1抑制剂组，分别进行Transwell迁移实验、细胞凋亡流式检测、线粒体膜电位检测评估各组骨髓间充质干细胞的迁移能力及抗凋亡能力；建立心肌梗死模型，1周后按分组在大鼠梗死心肌周围多点注射骨髓间充质干细胞，2周后制备心肌冰冻切片行DiI染色统计骨髓间充质干细胞存活数量；心肌梗死模型建立前后、细胞移植4周行超声心动图检查评估大鼠心脏功能。 结果与结论：①低氧处理12 h时，骨髓间充质干细胞的 Pim-1、p-Akt及Bcl-2 表达量明显升高，Bax、Caspase-3表达量明显降低。②低氧组骨髓间充质干细胞抗凋亡能力明显增强，与正常对照组之间差异有显著性意义(P 0.01)。③低氧组骨髓间充质干细胞移植1周后存活率明显提高(P 0.001)；移植4周后，大鼠心功能明显改善(P 0.05)。上述获益可被Pim-1抑制剂抑制。④结果证实，低氧预处理骨髓间充质干细胞通过激活Akt及上调Pim-1表达抑制细胞凋亡，改善骨髓间充质干细胞对缺血性心脏病的治疗效果。 关键词： 干细胞；骨髓干细胞；低氧；凋亡；骨髓间充质干细胞； Pim-1；Akt；心肌梗死 主题词： 骨髓；间质干细胞；细胞低氧；细胞凋亡；心肌梗塞；组织工程 PAGE 1995 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 4 P.O.Box 1200,Shenyang 110004 k Hypoxic preconditioning inhibits apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells through overexpressing Pim-1 Zhang You1, Yan Wei-ya2, Shen Zheng-ya2, Yang Jun-jie3, Hui Jie1(1Department of Cardiology, 2Department of Cardiovascular Surgery, the First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou 215000, Jiangsu Province, China; 3Institute of Cardiovascular Disease, Soochow University, Suzhou 215000, Jiangsu Province, China) Abstract BACKGROUND: Bone marrow mesenchymal stem cells h