伊犁鲈微卫星位点的筛选及近缘物种通用性.pdfVIP

　动物学杂志 Chinese J ournal of Zoology 　2009 ,44 ( 1) :17～23 伊犁鲈微卫星位点的筛选及近缘物种通用性 海 　萨①② 　李家乐① 　刘 　峰① 　冯建彬① ( ①上海海洋大学水产与生命学院　上海 　201306 ; ②新疆水产科研所 　乌鲁木齐 　830000) ( ) 摘要 : 为开发伊犁鲈 Perca schrenkii 分子标记用于鲈属鱼类种质资源保护 , 以伊犁鲈为材料 ,应用磁珠 富集法进行了微卫星标记的筛选 。从伊犁鲈尾鳍提取总 DNA ,进行酶切 、接头连接 、PCR 扩增 ,再采用生 ( ) ( ) 物素标记 CA 15 探针及生物素标记 TG 15 探针对扩增产物进行杂交富集 ,经再次 PCR 扩增及 TA 克隆 , 成功构建了伊犁鲈基因组微卫星富集文库 。采用重复序列引物筛选获得阳性克隆 ,随机选取 48 个阳性 克隆进行测序 ,测得序列 46 个 ,其中38 个克隆含有微卫星序列 ,41 个位点的微卫星重复数在 8 次以上 。 根据测得序列设计 17 对微卫星引物 ,均能在伊犁鲈群体中扩增获得 目的条带 。采用该 17 对引物对河 ( ) ( ) 鲈 P . f luviatilis 及黄金鲈 P . f lavescens 群体样本进行扩增 ,10 对引物具有通用性 ,其中6 对在河鲈中具 ( ) 有高度多态性 PIC 05 ,5 对在黄金鲈中具有高度多态性 。 关键词 : 伊犁鲈 ;河鲈 ;黄金鲈 ;微卫星标记 ;磁珠富集法 ( ) 中图分类号 :Q951 　文献标识码 :A 　文章编号 2009 011707 Isolation of Microsatellite Loci from Perca schrenkii and its Universal in Related Species ①② ① ① ① HAI Sa 　L I JiaLe 　L IU Feng 　FEN G JianBin ( ①College of Fisheries and L if e Science , Shanghai Ocean University , Shanghai 　201306 ; ② Institute of Fisheries Science , Xinj iang Uygur A utonomous Region , Wulumuqi 　830000 , China) Abstract :Microsatellites DNA was isolated and enriched from genome of Perca schrenkii by magnetic beads , and were also applied to the other two species in the same genus , i . e . P . f luviatili