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紫外分光光度法检测荷叶中荷叶生物碱  系 科：医药与健康管理系 班 级：制药103 答辩学生：胡  指导老师： 为了较准确的检测荷叶中荷叶生物碱含量,采用了紫外分光光度法，以荷叶碱为对照，溴甲酚绿为显色剂，在荷叶生物碱最大吸收波长415nm处进行测定。可得线性回归方程为y=14.12x-0.013，R=0.9998（n=5），说明了荷叶生物碱在0.02～0.10mg/mL 范围内线性关系良好，平均回收率达98.31%，RSD为2.10 %，回收率为98.31%，RSD%为2.10%。此实验表明紫外分光光度法操作简便、灵敏度高。 基本结构 1 绪论 2 材料与仪器 3 方法 4 结果与分析 5 结论 1 绪论 荷叶：荷叶为睡莲科植物莲的干燥叶，具有清暑化湿、升发清阳、减肥降脂、升发清阳、凉血止血之功效，主要用于暑热烦渴、暑湿泄泻、脾虚泄泻、血热吐衄、便血崩漏等症状。因此，测定总生物碱的含量对于控制其质量、确保疗效有重要意义。 荷叶生物碱：多属于阿扑啡类生物碱，此类化合物具有显著的降脂减肥、抗病毒、抑菌、抗惊厥等药理作用。 紫外分光光度法:由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。 2 材料与仪器 材料：1.标准品，荷叶碱、含0.85%生物碱的干荷叶、干荷叶； 2.供试品，氯仿、溴甲酚绿、邻苯二甲酸氢钾； 主要仪器与设备：紫外分光光度计、电子天平、数显恒温水浴锅、粉碎机； 3 方法 3.1 溶液配制：（1）溴甲酚绿溶液，称取溴甲酚绿0.10g，加入7.2ml的0.02mol/LNaOH溶液溶解，蒸馏水定容至250mL；（2）0.02mol/l NaOH，称取0.08gNaOH于100ml的容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度；（3）邻苯二甲酸氢钾缓冲液，将邻苯二甲酸氢钾粉末倒入250mL容量瓶中，用少量蒸馏水冲塑料袋内壁并稀释至刻度；（4）80%乙醇，称取80ml食品学院提供的无水乙醇再加20ml的水；（5）0.42mg/ml荷叶标准品溶液，电子天平称取4.2mg荷叶标准品于10mL容量瓶中，加水至刻度线定溶。 3.2 荷叶生物碱最大吸收波长的确定 荷叶碱标准品及标准品经溴甲酚绿染色后的最大吸收波长 　　 称取4.2mg荷叶碱标准品于10mL容量瓶中，用氯仿溶解定容，以氯仿为空白，用紫外分光光度计在190～800nm 下扫描，测得荷叶碱的紫外最大吸收波长。 　　　荷叶碱标准品染色后的最大吸收波长。精密称取4.2mg荷叶碱标准品于10mL容量瓶中，用氯仿定容，混匀，吸取1mL于10mL分液漏斗中，加入邻苯二甲酸氢钾缓冲液1mL，溴甲酚绿溶液1mL，振荡，加入5mL氯仿，振荡30s，静置30min。取下层氯仿液4mL，以标准品空白为对照，在紫外分光光度计的190～800nm下扫描，测得荷叶碱标准品经溴甲酚绿染色后的最大吸收波长。 样品荷叶生物碱经溴甲酚绿染色后的最大吸收波长 样品经溴甲酚绿染色后的最大吸收波长。称取荷叶2.0g，加入浓度为80%的乙醇80mL，于80℃ 的恒温水浴加热。趁热过滤，用80%乙醇定容至80mL，即为样品液。吸取1mL样品液于10mL分液漏斗中，挥去乙醇，加入邻苯二甲酸氢钾缓冲液1mL，溴甲酚绿溶液1mL，振荡，加入5mL氯仿，振荡30s，静置30min。取下层氯仿液4mL，以未加样品液的乙醇试剂空白为对照，在紫外分光光度计的190～800nm下扫描，测出样品液经溴甲酚绿染色后的最大吸收波长。 3. 3 荷叶碱标准曲线制备 分别精密吸取荷叶碱标准品溶液0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mL于5mL容量瓶中