对体外成熟猪卵母细胞激活与胚发育之影响.pdf

．弘光學報56 期． 不同濃度之Calcium ionophore (A23187)對體外 成熟豬卵母細胞激活與胚發育之影響 1, 3＊ 2 1 林育安 廖明輝 陳銘正 1宜蘭大學動物科技學系 2屏東科技大學獸醫學系 3屏東科技大學熱帶農業暨國際合作系 收到日期：98.4.13　 修訂日期：98.4.28　 接受日期：98.5.1 摘要 本試驗之 目的 ，乃研究不同濃度之calcium ionophore (A23 187)對體外成熟豬卵母細胞之激 活與發育之影響 。豬卵母細胞經體外成熟培養48小時後 ，分別以0 、100 、200與300 μM之calcium ionophore (A23187)激活5分鐘 ，隨後培養於NCSU-23胚培養液中16小時或144小時 ，檢查卵母細胞之 激活與胚發育情形 。試驗結果顯示 ，0 、100 、200 與 300 μM組卵母細胞之激活率分別為7.7 、56.2 、 53.7與32.6% (P0.05) ，100 μM組與200 μM組 ，彼此間無顯著差異 ，但當calcium ionophore (A23187) 之濃度增加到300 μM時 ，卵母細胞之激活率則顯著下降(P0.05) 。卵裂率與囊胚率方面 ，均以100 μM組最高(P0.05) ，300 μM組發育到桑椹胚階段就終止發育 。 關鍵詞：豬卵母細胞 、體外成熟 、孤雌激活 ＊通訊作者 85 ．不同濃度之Calcium ionophore (A23187)對體外成熟豬卵母細胞激活與胚發育之影響． 壹、前言 鼠(Steinhardt et al., 1974) 、海膽(Steinhardt and Epel, 1974)與牛(Ware et al., 1989)等 。目前 ，豬 自從Wilmut et al .( 1997)以成年母綿羊之 卵母細胞以Calcium ionophore (A23 187)激活處 乳腺體細胞進行核移置 ，複製出桃莉綿羊後 ， 理也已使用多年 ，但使用濃度高於50 μM之報 除了使核移置之技術往前邁進一大步之外 ，也 告相當有限 。因此 ，本試驗之 目的 ，主要是探 完全推翻了以往認為動物進行核移置只能使用 討Calcium ionophore (A23 187)激活劑之濃度 ， 未分化胚之細胞核或非常早期之胚細胞才能成 對體外成熟豬卵母細胞激活及 隨後發育之影 功之觀念 ，並且在世界各地引起了一股複製之 響 ，期能提高激活率並希望此系統可提供作為 風潮 。陸續也有其他動物被複製成功 ，例如 往後豬卵母細胞在核移置 （複製 ）時所需之激 小鼠(Wakayama et al., 1998) 、牛(Cibelli et al., 活參考條件 ，或是進行細胞質精子注射時 ，以 1998) 、山羊 (Baguisi et al., 1999) 、豬 (Polej aeva 提高精子濃縮與雄原核形成率 。另一方面