洁净区沉降菌测试SOP.docx

洁存至（区）沉降菌测试SOP 文件编码 Copy Ns 起草： 日期： 审核： 日期： 批准： 日期： 执行批准： 日期： 变更内容 修订号 修订原因与内容 执行日期 00 新制订 01 文件复审 02 文件修定 03 文件修定 04 分发单位 质 量 部［］ 生产技术部［ ] 采 供 部［ ] 研 究 所［］ 行 政 部［ 1 财务审计部［ ] 营 销公司［］ 前处理提取车间［ ] 固体制剂一车间［ ] 固体制剂二车间［］ 液体制剂车间［ ] 设备动力车间［ ] QA 室[] QC 室[ ] 主题内容 本标准规定了洁净区沉降菌的测试方法和基本要求。 适用范围 本标准适用于洁净区（包括洁净工作台）沉降菌的测试。 职责 QC室主任：负责监督该文件执行。 QC环境卫生监测员：负责严格执行该文件，对所得数据真实可靠，报告及时准确负责。 制定依据 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法（GB/T16294?2010） 内容 5.1仪器设备 5」」培养皿（（p90mm15mm） 5.1.2培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA） 5.1.3恒温培养箱、高压蒸气灭菌器 5.2测试前准备及要求 5.2.1在测试之前，要对洁净室（区）以下参数进行预先测试及确认，以提供测试沉降菌的环境 条件。 温湿度（温度:18°C~26°C,相对湿度：45%?65%）； 压差（洁净区与非洁净区和洁净区与洁净区之间的静压差10Pa）； 换气次数（A级风速为0.36?0.54m/s； C级的换气次数为20次/h； D级换气次数为215次/h。）； 高效过滤器检漏（应无泄漏）。 保证上述测试能够达到相应参数要求，方可进行沉降菌的检测。 522测试状态有静态和动态两种，并在报告屮注明测试状态。静态测试时，室内测试人员 不得多于2人。被测试洁净室（区）已消毒。测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作 月艮。测试报告中应标明测试时所采用的状态。 523在静态a （无生产人员）测试时，对单向流洁净室而言，测试宜在净化空气调节系统止常运 行时间不少于lOmin后开始，对非单向流洁净室，测试应在净化空调系统正常运行不少于 30min开始。在静态b测试时（生产结束人员撤离），对单向流洁净室而言，测试应在生产 操作人员撤离现场并经过20min自净后开始，对非单向流洁净室，测试应在生产操作人员撤 离现场并经过30min自净后开始。 5.2.4在动态测试时，洁净区已处于正常生产状态下进行的测试。 525培养皿制备将培养皿在121°C湿热灭菌30分钟。配制培养基并灭菌，将灭菌培养基加热熔 化，冷至45?60°C,在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿15?20ml，待培养基凝 固后，将培养基平皿倒置于30?35°C恒温培养箱中培养48小吋，若培养基平皿上确无菌落 牛长，即可供采样用。 5.3测试 5.3.1采样点数量及位置 根据洁净区（室）面积大小确定最少采样点数目，在满足最少采样点数目的同时，还宜同 时满足最少培养皿数。采样点的布置应力求均匀（见采样点布置图），避免在某局部区域过 于集屮，培养皿应布置在有代表性的地方（如关键设备或易受污染的地方）和气流扰动最 小的地方。工作区测试点位置离地0.8?L5m左右（略高于工作面），可在关键设备或关键 工作活动范围处增加测点。最少采样点数目可按表5?1执行，最少培养皿数按表5?2执行。 表5?1最少采样点数目 面积 m2 洁净区的级别 A级 C级 D级 ＜10 2?3 2 2 210 ?V20 4 2 2 $20 ?＜40 8 2 2 $40 ?＜100 16 4 2 2100?V200 40 10 3 $200?＜400 80 20 6 2400?VI000 160 40 13 $1000?＜2000 400 100 32 2000 800 200 63 注：对于A级的单向流洁净室（区），包括A级洁净工作台表，面积指的是送风口表面积; 对于C级以上的非单向流洁净室（区），而积指的是房间的积。 表5?2最少培养皿数 洁净度级别 所需4）90mmxl5mm培养皿（以沉降0.5 h /静态或4h /动态计） A级 14 C级 2 D级 2 5.3.2采样方法 静态：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露 0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置，倒置于30?35°C恒温培养箱中培养48小时。 动态：在正常生产状态，将制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，采用同一位置多次 取样的方法，每次打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，将培养皿盖上盖后倒置收 回，同一位置连续保放置8次，使培养基表而暴露时间累加为4小时。分批倒置于30?35°C 恒温培养箱中培养48小时。 5.4菌落计数 541达到规定的培养时间后，菌落数用肉眼