GB/T 13093-1991饲料中细菌总数的测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准 f 饲料中细菌总数的测定方法 GB 13093一91 Method for determination of aerobic bacterial count in feeds 本标准参照采用国际标准ISO 4833-1978《食品和动物饲料中微生物学检验方法》。 1 主肠内容与适用范围 本标准规定了饲料中细菌总数的测定方法。 本标准适用于饲料中细菌总数的测定。 2 原理 将试样稀释至适当浓度，用特定的培养基，在30士1℃下培养72士3h，计数平板中长出的菌落数，计 算每克试样中的细菌数量。 3仪器、设备 3.1天平:感量为。.1 B= 3.2振荡器:往复式。 3.3干热灭菌箱:50^-200士1 0C。 3.4高压灭菌锅。 3.5冰箱:普通冰箱。 3.6恒温箱:30士1C。 3.7电炉:可调式。 3.8平皿:直径为9 cm. 3.9吸管:容量为1,10 mL, 3.10三角烧瓶:容量为250,500 mL, 3.11玻璃珠。 3.12试管:18X180 ram. 3.13水浴锅:46士1C。 3.14 酒精灯。 3.15试管架。 3.16橡皮乳头。 4 检验程序 细菌总数的检验程序如下 国家技术监仔局1991一07一16批准 1992一04一01实施 免费标准下载网() 无需注册 即可下载 GB 13093一91 5操作步骤 5.1采样 采样时必须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具，如灭菌 牛皮纸袋或广口瓶，金属勺和刀，在卫生学调查基础上，采取有代表性的样品，样品采集后应尽快检验， 否则应将样品放在低温干燥处。 根据饲料仓库、饲料垛的大小和类型，分层定点采样，一般可分三层五点或分层随机采样，不同点的 样品，充分混合后，取500 g左右送检，小量存贮的饲料可使用金属小勺采取上、中、下各部位的样品混 乙、 口 0 海运进口饲料采样:每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点取样混合，如船仓 盛饲料超过10 000 t，则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。 5.2试样稀释及培养 5.2.1无菌称取试样10. 0 g，放人含有90 mL稀释液的灭菌三角烧瓶内(瓶内预先加有适当数量的玻 璃珠)。经充分振摇，制1:10的均匀稀释液。最好置振荡器中以8 000^10 000 r/min的速度处理2^-3 min,5.2.2 用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL,沿管壁慢慢注人含有9 mL稀释液的试管内(注意吸管 尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀，作成1:100的稀释液。 5.2.3另取一支1 mL灭菌吸管，按上述操作顺序，作1。倍递增稀释，如此每递增稀释一次，即更换一支 吸管。 5.2.4根据饲料卫生标准要求或对试样污染程度的估计，选择2-3个适宜稀释度，分别在作10倍递增 稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1 mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 5.2.5稀释液移入平皿后，应及时将凉至46士1℃的平板计数用培养基(可放置46士1℃水浴锅