蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因(RcGPDH)的克隆及功能分析.pdfVIP

2011年10月 中国油料作物学报 2011，33(5)：451—458 Chinese ofoil sciences journalcrop 蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因 (RcGPDH)的克隆及功能分析 弭宪杰啦，徐荣华2，刘爱忠2，吴丁1”，田波2+ (1．江西农业大学园林与艺术学院，江西南昌，330045；2．中国科学院西双版纳热带植物园， 云南昆明，650223；3．江西省景德镇高等专科学校，江西景德镇，333000) 摘要：为了阐明蓖麻三磷酸甘油脱氢酶基因(glycerol一3一phosphate 程中的作用，本研究根据已报道的蓖麻种子表达序列标签(ExpressedSequenceTags，EST)设计引物，通过RACE ofcDNA ends)方法克隆蓖麻RcGPDH基因的全长并对其序列进行分析，构建了该基因的酵母 (rapid—amplification 菌株BY4742。运用分光光度法测定转基因酵母的生长曲线，通过香草醛法测定稳定生长期的转基因酵母的油脂含 量。结果表明。转基因菌株比转空载体对照菌株生长慢，两者均在培养18h后进入平台期；两个菌株的油脂含量没 有明显的差别，表明RcGPDH基因对酵母油脂的累积没有起到积极的作用，在蓖麻种子中可能还存在另一个GPDH 同源基因参与三脂酰甘油(TAG)的合成。 关键词：蓖麻；三磷酸甘油脱氢酶；三脂酰甘油 中图分类号：Q786，S565．6．1文献标识码：A 文章编号：1007—9084(2011)05一0451—08 andcharacterizationof castorbeall gene(RcGPDH)from Cloning glycerol一3一phosphatedehydrogenase MI B02’ Xian—jiel一，XURong—hua2，LIUAi—zhon92，WUDin91一，TIAN 330045，China； ofHorticulture，JiangxiAgriculturalUniversity，Nanchang (1．Department Botanical Garden，Chinese 650223，China； 2．XishuangbannaTropic AcademyofSciences，Kunming ComprehensiveCollege，Jingdezhen333000，China) ．3．Jingdezhen ordertoelucidatetheroleof Abstract：In glycerol一3一phosphatedehydrogenase castorbeanincastoroil to cloned accumulation，we tags(EST)and designedprimersaccordingexpresssequence full