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表达嵌合抗原受体 Jurkat 细胞株的筛选及 功能研究# 1,2 2 2 2,3 1,2** 朱洋洋 ，刘辉 ，王颖 ，汪毕 ，钱其军 5 （1. 浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所，杭州310018； 2. 第二军医大学东方肝胆医院病毒基因治疗实验室，上海200438； 3. 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院，苏州 215123 ） 摘要：目的：血管内皮生长因子（VEGF ）在各种人类实体瘤中过表达，本课题拟获得对 VEGF 有明显趋向性的 T 细胞株，为后继细胞治疗提供理论基础。方法：合成针对 VEGF 10 的嵌合抗原受体基因结构，克隆入慢病毒载体；三质粒磷酸钙法共转染293T 细胞，收集病 毒后感染Jurkat 细胞；经G418 筛选及克隆挑选得到稳转细胞株；PCR 及流式细胞术检测筛 选细胞株中目的基因的整合与表达；Transwell 实验检测所筛选的细胞株对VEGF 的趋化效 果。结果：琼脂糖凝胶电泳显示慢病毒载体pLV120gn-FLT1CAR 构建正确；PCR 及流式细 胞术表明 FLT1CAR 已经整合到 Jurkat 细胞中并稳定表达；趋化实验表明筛选的细胞株 15 Clone1 、Clone2 对VEGF 有显著趋化效果。结论：本文成功筛选到稳定表达FLT1CAR 的细 胞克隆，并且此细胞克隆对VEGF 有明显的趋向作用。 关键词：分子生物学；VEGF；嵌合抗原受体；Jurkat 中图分类号：Q786 Screening and Functional Research on Jurkat Cell Strain of 20 Stable Chimeric Antigen Receptor Expression 1,2 2 2 2,3 1,2 ZHU Yangyang , LIU Hui , WANG Ying , WANG Bi , QIAN Qijun (1. Xinyuan Institute of Medicine and Biotechnology,School of Life Sciences, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, Zhejiang, China; 2. Laboratory of Virus and Gene Therapy, Eastern Hepatobiliary Surgical Hospital, Second 25 Military Medical University, Shanghai 200438, China; 3. School of BiologyBasic Medical Sciences,Medical College,Soochow university,Suzhou