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- 2019-11-30 发布于天津
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实验一 生物组织中还原糖、
脂肪、蛋白质的鉴定;教学内容:;一、实验原理;2.脂肪的鉴定 ;选材:含糖量较高的白色或近于白色,苹果、梨最好 。 ;2.脂肪的鉴定 ;3.蛋白质的鉴定 ;三、实验成功的关键与注意事项:; (1)斐林试剂很不稳定,故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)分别配制、储存,使用时,再临时配制,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。
(2) 鉴定可溶性还原糖,加热试管时,应该用试管夹夹住试管上部,放入盛开水的大烧杯加热;注意试管底部不接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾,可以提起试管夹,使试管与沸水接触面减少,以免溶液溢出。
; (3) 在鉴定脂肪的实验中,若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡3~4小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。
(4) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色时间不宜过长(否则酒精将脂肪溶解影响实验效果),观察时找最薄处最好只有1—2层细胞。
; (5)在蛋白质的鉴定实验中,若用蛋白质作实验材料,必须稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净。
(6)双缩脲试剂的使用,应先双缩脲加试剂A(0.1g/mL的NaOH溶液),造成碱性的反应环境,再加试剂B(0.01g/mL的CuSO4溶液)。;例1 将小麦种子分别置于20℃和30℃培养箱中培养4天,依次取等量的萌发种子分别制成提取液Ⅰ和提取液Ⅱ。取3支试管甲、乙、丙,分别加入等量的淀粉液,然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水,45℃水浴保温5分钟,立即在3支试管中加入等量斐林试剂并煮沸2分钟,摇匀观察试管中颜色。结果是 ( );A.甲呈蓝色,乙呈砖红色,丙呈无色
B.甲呈无色,乙呈砖红色,丙呈蓝色
C.甲、乙皆呈蓝色,丙呈砖红色
D.甲呈浅砖红色,乙呈砖红色,丙呈蓝色; 各种可供实验的材料; 1、某些单子叶植物,如??菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:; 3、某学生在鉴定脂肪的实验中,在显微镜下观察花生子叶切片,当转动细调节器时,有一部分细胞看的清楚,另一部分较模糊,这是由于?? (? )
A.反光镜未调节好??? B.标本切的厚薄不均?
C.细调节器未调节好 D.显微镜物镜损坏 ;5、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是?
A.先加A液,混合后再加B液摇匀观察( )
B.先加B液,混合后再加A液摇匀观察
C.A、B混合后加入,摇匀观察
D.A、B液同时加入样液,摇匀后观察 ;五、作业:;再见
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