科学·技术·社会植物的组织培养 (6).pptVIP

选修1第35讲 植物的组织培养技术 选修1第35讲 植物的组织培养技术 选修1第35讲 植物的组织培养技术 选修1第35讲 植物的组织培养技术 选修1第35讲 植物的组织培养技术 生物技术实践 植物的组织培养技术 选修1 1．菊花的组织培养。 2．月季的花药培养。 理论依据 细胞的全能性 过程简图 离体的植物组织或器官(外植体) ↓脱分化 愈伤组织 ↓再分化 试管苗(先长出丛芽后生根) ↓移栽 完整的植物体 一、植物的组织培养 植物组织培养的有关概念 　　1.外植体：是指用于离体培养的植物器官或组织。 　　2.愈伤组织：是指离体的植物组织或细胞，在培养了一段时间以后，通过脱分化形成的不定形的薄壁细胞。 　　3.细胞分化、脱分化和再分化 　　（1）细胞分化：是指植物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上产生稳定性差异的过程。 　　（2）脱分化：是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫做去分化。 　　（3）再分化：是指脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 理论依据 细胞的全能性 影响因素 (1)外植体的选择：材料本身的种类，同一植物材料的年龄、保存时间的长短等 (2)营养条件：无机营养(大量元素、微量元素)和有机营养(维生素、甘氨酸、烟酸、肌醇以及蔗糖等) (3)植物激素 ①常用激素：生长素和细胞分裂素 ②使用这两种激素顺序不同，实验结果不同(见教材表) ③这两种激素比值不同，对细胞发育方向的影响不同(见教材旁栏) 理论依据 细胞的全能性 实验操作 制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 (1)植物组织培养常用的一种培养基是MS培养基，除了大量元素、微量元素、有机物等，另外还要添加植物激素。MS培养基中微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 　　(2)灭菌方式：高压蒸汽灭菌。 　　(3)MS培养基与微生物培养基的比较: 　　微生物培养基以有机营养为主，而MS培养基则需提供大量无机营养。 　　二、月季的花药培养 　　1.被子植物的花粉发育 　　2.产生花粉植株的两种途径 　　 　　这两种途径的区别主要取决于培养基中　　　　　　　　　　　的配比。 激素的种类及其浓度 主要因素 材料的选择 从花药来看，应当选择初花期的花药 从花粉来看，应当　　　选择的花粉 从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾 培养基的组成 培养基各成分中，植物生长调节剂的水平和配比，常对诱导细胞的分裂、生长和分化起决定作用。在诱导愈伤组织或胚状体产生的诱导培养基中，广泛地使用2，4—D、NAA等 其他因素 植物的种类、亲本植株的生长条件、材料的 　　预处理、种密度、培养的环境条件等 3.影响花药培养的因素 低温 单核期 项目 花药培养技术 植物组织培养 不同点 生殖方式 有性生殖 无性生殖 操作流程 制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 材料的选取→材料的消毒→接种和培养→鉴定和筛选 三、花药培养技术和植物组织培养技术的比较 项目 花药培养技术 植物组织培养 不同点 取材 取材为花药(需事先摸索时期适宜的花蕾)，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育。必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种 外植体为体细胞，染色体数无需加倍 项目 花药培养技术 植物组织培养 不同点 转移培养 花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体要及时更换培养基培养。花药培养对培养基配方的要求更为严格 不需转移便可再分化为植株 鉴定筛选 需要 不需要 相同点 (1)原理：植物细胞的全能性 (2)过程：脱分化、再分化 (3)操作：培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同 激素使用 实验结果 使用顺序 先生长素后细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先细胞分裂素后生长素 细胞既分裂也分化 生长素与细胞分裂素同时使用 分化频率提高 　　四、植物激素在组织培养中的重要作用 　　生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，其作用特点为： 激素使用 实验结果 生长素用量与细胞分裂素用量的比例 该比值高时 利于根的分化，抑制芽的形成 该比值低时 利于芽的分化，抑制根的形成 该比值适中时 促进愈伤组织的生长 　　1.植物细胞具全能性的原因是什么？不同细胞的全能性表达难易程度如何？ 　　　植物细胞具有全能性的原因是因为植物体的每一个具核的活细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。 　　不同细胞的全能性表达难易程度不同。最易表达的是受精卵；其次是生殖细胞(未受精的卵细胞和花粉细胞)；第三是各种分生组织等薄壁细胞；然后是其他已经分化的