《鲤鱼不同组织过氧化物酶的活性测定》-毕业论文（设计）.docVIP

PAGE 精品 鲤鱼不同组织过氧化物酶的活性测定 重庆师范大学 生物科学 指导教师 摘要：本文应用愈创木酚为底物，利用分光光度法测定反应液的吸光度，以吸光度的变化速率来表征过氧化物酶的活力。通过试验得到鲤鱼肾脏、心脏、肌肉三种不同组织过氧化物酶酶活性分别为312.6、287.1、158.1 u/g，并对鲤鱼不同组织过氧化物酶的活性进行了比较与分析。 关键词：过氧化物酶；愈创木酚；酶活力；分光光度法 Determining Peroxidase Activity Of Different Tissues From Cyprinus Carpio Chongqing Normal university Biology science 2003 Li Zhengyang Tutor : Xu Ping Abstract : It was using guaiacol as substrate and enzyme activity was showed by the OD value variety in the reaction liquid , and the catalytic activity peroxidase was measured by spectrophotometer . And bye the way comparisoning and analysising peroxidase activity of different tissues from cyprinus carpio. In addition, the relevant data of Peroxidase ( POD ) activity is that: the kidney is 10.42 U/g.min, the cardiac muscle is 9.57 U/g.min, and the flesh is 3.43 U/g.min. The end ,repetition test is carried out to confirm the accuracy and precision of the method . Key words : peroxidase ; aniline ; enzyme activity；spectrophotometer 过氧化物酶（peroxidase，POD，EC 1.11.1.7）是一种生物氧化中的末端氧化酶[1]，能够分解生物体内某些代谢产物需氧脱氢后产生的，对机体有害物质。它广泛的存在于生物各个组织器官，在肝脏和血液中含量较高，具有一定的解毒功能。 POD作为细胞内重要的组成成分，具有许多非常重要的生理功能。由于其成分和结构的复杂性，同功酶的多样性，以及多基因编码特点，造成对其功能的认识尚不全面。 POD在食品、医药、环保和化工等行业中已得到广泛应用。POD独特的温度稳定性和优良的反应性使其成为同类酶中极其重要的一种：环保部门应用POD处理工业废水；将POD应用到医疗诊断试剂盒，生产其产品的性能与质量均超过了传统的HRP-I（ 转录调节蛋白抗体[2]）试剂盒；在树脂生产工业中POD成功的代替了传统合成工业中的甲醛，大大降低了成本。此外，许多大公司都争先恐后的研究开发了POD在生物芯片、多种塑料及建筑材料胶合剂生产中的应用；POD污染水和污染土壤的生物修复中也会有极高的应用价值。 本次实验的主题是探究POD的活性，采用的实验方法是愈创木酚法[3]。即以愈创木酚（邻甲氧基苯酚）和H2O2为底物，过氧化物酶催化H2O2放出新生态氧，使无色的愈创木酚氧化成红棕色的四邻甲氧基连酚, 则过氧化物酶活力的大小在一定范围内与产物颜色的深浅呈线性关系，故可通过测定A436的变化率来测定过氧化物酶的酶活力单位，从而分析比较过氧化物酶的生物性、组织特性。 愈创木酚 + 过氧化氢 →四邻甲氧基连酚 + 水 实验意义在于更具体、全面的了解、掌握它的特性及催化作用环境，以便更好的在现代生活、高新科技进行应用。 1、实验材料与方法 1．1 原料、试剂与仪器 电分分析天平、研钵、纱布、冰箱、冷冻离心机、微量进样器、比色杯、紫外可见分光光度计、秒表 30%的H2O2、0.018mol/L的愈创木酚、0.1mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0）和0.1mol/L的磷酸缓冲液（pH7.2）、鲤鱼（市场上购买） 1. 2 实验方法及步骤、 1.2.1 待测酶液的制备 称取鲤鱼的心脏，肾脏和肌肉三种组织各4.8g，放进研钵中，再分别加入20ml 0.1mol/L的