免疫学技术在科研中的应用教程文件.pptVIP

本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 免疫胶体金技术 氯金酸(HAuCl+)在还原剂作用下，产生分散状态的胶体金颗粒。碱性条件下，金颗粒表面带负电荷，与蛋白质正电荷基团结合。 胶体金可标记白蛋白、免疫球蛋白、糖蛋白、激素、脂蛋白、植物血凝素、卵白素等。大分子以单层形式吸附在金颗粒表面。 不同还原剂作用于氯金酸，产生的胶体金粒径大小不相同(5—50nm)，小粒径的胶体金由于穿透性好，电子密度高，常被用于免疫电镜技术。这些小粒径的金颗粒，经银显影液处理后，金粒子还原银离子生成银颗粒而吸附在金颗粒周围呈黑褐色，从而放大了金颗粒的显色效果，又称免疫金银法。 胶体金颜色随颗粒大小而变化，大于20 nm的金颗粒在光镜下呈现砖红色，可在光镜水平行免疫分析，也可用银显影剂增强，进一步提高灵敏度。 当胶体金的粒径较大、浓度密集时肉眼水平即可观察，即胶体金斑点渗滤试验和胶体金斑点免疫层析试验。 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 免疫细胞的检测 免疫细胞的分离 磁珠分离法 fluorescence-activated cell sorter，FACS 免疫细胞功能的测定 T细胞 B细胞 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 磁珠分离法 特异性分离所需淋巴细胞的方法。 将特异性抗体(如抗CD3、抗CD4、抗CD8等)吸附在铁颗粒(磁珠)上，加至细胞悬液中，具有相应抗原的细胞与磁珠上的特异性抗体结合。 反应管置于磁场中，铁颗粒受磁场的吸引，携带有相应细胞的磁球吸附于靠近磁铁的管壁上。 弃细胞悬液，重新解离细胞与磁珠。 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! fluorescence-activated cell sorter，FACS 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! T细胞鉴定及功能测定 使用酶、免疫荧光标记单抗进行鉴定 淋巴细胞转化试验 E花环形成试验 混合淋巴细胞培养 CTL介导的细胞毒试验 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 抗原肽—MHC分子四聚体技术tetramer 用生物素化的抗原肽—MHC分子复合物与荧光标记的亲合素结合，由于1个荧光素标记的亲合素可结合4个生物素分子，能使4个MHC／抗原肽复合物形成一个复合体，将该复合体标记荧光素后，即成抗原特异性四聚体。 抗原特异性四聚体能与样品中的特异性T细胞的TCR结合，由于四聚体能同时结合一个T细胞表面的4个TCR，亲和力大大提高。用流式细胞术即可确定待检标本中抗原特异性CTL细胞的频率。 MHC分子可为工类或Ⅱ类分子，与抗原肽形成的四聚体复合物，可分别鉴定表达特异性TCR的CD8+T细胞及CD4+T细胞的频率。 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! B细胞的鉴定及功能测定 检测B细胞分化抗原 测定B细胞产生抗体的能力 溶血空斑试验 ELISPOT 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 细胞因子的检测 生物活性检测 细胞增生或增生抑制法 细胞病变抑制法 趋化作用测定法 免疫学检测法 分子生物学技术 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 基因敲除技术和转基因动物 应用基因同源重组，将外源有功能基因(基因组中原先不存在、或已失活的基因)，转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组，插人到基因组中，在细胞内获得表达。 通过同源重组产生目标基因缺失或失活的转基因动物可以确定被敲除的基因在体内代谢过程中的作用，还可确定被敲除基因在分化、发育、生存等过程中的作用和必要性。 转基因动物可以作为疾病模型。 可以用于药物筛选的动物模型。 转基因动物可作为“生物反应器”生产药物。 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 免疫新技术在科研中的应用 本文由探生科技技术人员提供,Fantibody全球抗体搜索引擎，您身边的抗体专家! 相关帮助 需要