葡萄VvAGL11和VvAGL15基因的鉴定及其在赤.pdf

－ 　 南京农业大学学报　 ２０１９ꎬ４２(２):２６１ ２６９ ｈｔｔｐ:/ / ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＤＯＩ:１０.７６８５/ ｊｎａｕ.２０１８０３０５４ 崔梦杰ꎬ郭凤菲ꎬ王晨ꎬ等. 葡萄ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５基因的鉴定及其在赤霉素诱导葡萄无核果实发育过程中的作用[Ｊ]. 南京农业大学学 － 报ꎬ２０１９ꎬ４２(２):２６１ ２６９. 葡萄 ＶｖＡＧＬ１１和 ＶｖＡＧＬ１５基因的鉴定及其在 赤霉素诱导葡萄无核果实发育过程中的作用 １ ２ １∗ １ １ １ 崔梦杰 ꎬ郭凤菲 ꎬ王晨 ꎬ纠松涛 ꎬ朱旭东 ꎬ房经贵 (１.南京农业大学园艺学院ꎬ江苏 南京 ２１００９５ꎻ２.南京大学生命科学学院ꎬ江苏 南京 ２１００２３) 摘要:[目的]本文旨在研究 ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５在应答赤霉素(ＧＡ )信号诱导葡萄无核果实发育过程中的作用ꎮ [方法] ３ 以‘巨峰’葡萄为试材ꎬ鉴定了ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５ 的ｃＤＮＡ全长序列ꎬ并通过分析基因的启动子顺式作用元件预测其潜在 功能ꎬ同时运用ＲＴ￣ｑＰＣＲ方法检测对照和ＧＡ 处理组葡萄ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５ 的时空表达水平ꎮ [结果]ＧＡ 处理能够诱 ３ ３ 导葡萄果实无核化ꎬ使葡萄果粒和果穗显著伸长ꎬ穗轴增粗ꎮ 同时ꎬ鉴定到ＶｖＡＧＬ１１(ＭＧ５８１４２３)和ＶｖＡＧＬ１５(ＭＧ５８１４２４)的 ｃＤＮＡ全长序列ꎮ ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５蛋白序列与可可和棉花的亲缘关系较近ꎻ二者均含有ＭＡＤＳ￣ＭＥＦ２￣ｌｉｋｅ和Ｋ￣ｂｏｘ家 － 族保守结构域ꎬ属于ＭＡＤＳ￣ｂｏｘ转录因子家族ꎻ其主要二级结构元件为α 螺旋和无规则卷曲ꎬ且主要定位于细胞核中ꎬ蛋白 结构具有保守性ꎮ 启动子顺式作用元件分析显示:二者均含有响应赤霉素和胚乳发育相关的ｍｏｔｉｆｓꎮ ＲＴ￣ｑＰＣＲ分析显示ꎬ 在果实硬核期和转色期的种子中ꎬＶｖＡＧＬ１１ 和 ＶｖＡＧＬ１５ 的表达量较高ꎬ而 ＧＡ 处理能够显著抑制其在种子中的表达ꎮ ３ [结论]鉴定到ＭＡＤＳ￣ｂｏｘ基因家族中的２个成员ꎬ分别为ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５ꎮ ＧＡ 处理可抑制 ＶｖＡＧＬ１１和ＶｖＡＧＬ１５在种 ３ 子区的表达ꎬ影响种胚的正常发育ꎬ从而形成无核果实ꎮ 关键词:葡萄ꎻＶｖＡＧＬ１１ꎻＶｖＡＧＬ１５ꎻ克隆ꎻ种胚发育