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ROS论文:ROS、MPTP介导肌细胞凋亡在大鼠失神经骨骼肌萎缩中的实验研究
【中文摘要】观察活性氧(ROS)、线粒体通透性转化孔(MPTP)在失神经骨骼肌萎缩后的表达变化及与肌细胞凋亡的相关性,探讨ROS、MPTP参与失神经骨骼肌萎缩的具体分子机制。方法选用30只健康的Vistar大鼠,体重为200~250g,雌雄不限,随机分为对照组(假手术组)、失神经2d组、失神经7d组、失神经14d组、失神经28d组,每组6只。制作坐骨神经切断后失神经支配的腓肠肌Vistar大鼠模型。分别于失神经第2d、7d、14d、28d处死大鼠(脊椎脱臼法),应用显微外科技术认真游离失神经腓肠肌,并称肌湿重。取腓肠肌标本的1/3立即做骨骼肌单细胞悬液,经DCFH-DA标记后,应用流式细胞术(FCM)检测失神经支配后腓肠肌细胞的ROS的含量;取腓肠肌标本的1/3做冰冻切片,经染色液标记后,激光共聚焦显微镜检测MPTP的开放情况;将剩余1/3的腓肠肌标本做冰冻切片后,脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测肌细胞凋亡。结果大鼠失神经支配后,肌细胞中的ROS、MPTP及凋亡率与正常对照组比较,表达随失神经支配时间的延长(28天)而持续增加,且各组的表达均显著高于对照组(P0.05),...
【英文摘要】To study the expression of reactive oxygen species (ROS), mitochondrial permeability transition pore (MPTP) in denervated skeletal muscle atrophy and its correlation of cell apoptosis,and explore specific molecular mechanism in denervated skeletal muscle.Methods A total of thirty Vista rats that have 200-250 weight randomly divided into five group: control group (sham operation),2 days group, 7 days group, 14days group, 28 days group. Standard model of denervated gastrocnemius muscle was estab...
【关键词】ROS MPTP 失神经支配 骨骼肌细胞 凋亡
【英文关键词】ROS MPTP denervated skeletal muscle apoptosis
【目录】ROS、MPTP介导肌细胞凋亡在大鼠失神经骨骼肌萎缩中的实验研究
中文摘要
5-6
Abstract
6-7
英文名称缩略表
8-9
前言
9-11
材料与方法
11-15
1 实验动物、试剂及实验仪器
11-12
1.1 实验动物
11
1.2 主要试剂
11
1.3 需配置的溶液
11
1.4 实验仪器
11-12
2 动物实验
12-13
2.1 实验动物分组
12
2.2 实验动物手术
12
2.3 术后动物饲养
12
2.4 标本采集
12-13
3 ROS 的检测
13
3.1 肥肠肌单细胞悬液的制备步骤
13
3.2 ROS 含量的检测
13
4 腓肠肌细胞MPTP 的检测
13-14
5 腓肠肌细胞凋亡率的检测
14
6 结果分析与统计学处理
14-15
实验结果
15-19
1 不同时间段失神经支配后腓肠肌细胞ROS 的检测
15-16
2 不同时间段失神经支配后腓肠肌细胞MPTP 的检测
16
3 TUNEL 法对肌细胞凋亡率的检测
16-17
4 不同时间段失神经支配后腓肠肌肌湿重比
17-18
5 ROS、MPTP 的表达与肌细胞凋亡率、肌湿重比的相关性分析
18-19
讨论
19-21
结论
21-22
参考文献
22-24
附图
24-28
综述
28-35
参考文献
32-35
个人简历
35-36
致谢
36
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