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专题2 :微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养一、基础知识: (一)微生物是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称.病毒界原核生物界微生物包括真菌界原生生物界病毒:动物病毒、植物病毒、细菌病毒病毒 SARS冠状病毒、 禽流感病毒朊病毒(蛋白质病毒)病毒的增殖:原核生物:一藻二菌三体常见的三种细菌典型形态球菌、杆菌、弧菌一、细菌 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。自养菌:异养菌: 腐生菌、寄生菌光能自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌基本结构:特殊结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等1.细菌的结构①细胞壁:肽聚糖;与细菌的致病能力有关;溶菌酶作用对象。②荚膜:细胞壁外多糖类物质——或称为粘液层;荚膜与致病菌的致病力有关。(如S型肺炎双球菌)③鞭毛:主要用于运动,数目多少不一。④纤毛:比鞭毛短、直、细,主要用于细菌之间的粘附或附着于宿主细胞。菌毛:数量少,参与细菌的接合,也是噬菌体入侵的受体。⑤质粒:环状DNA小分子,通过接合作用,质粒可以在不同细胞之间迁移,使质粒上的耐药性基因可以在细菌之间传播,质粒可用作基因工程的载体。⑥细胞膜、⑦拟核、⑧核糖体 2.细菌的形态:杆菌、球菌、弧菌、螺旋菌分裂生殖3.细菌的生殖方式:4.细菌的休眠体——芽孢 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.芽孢——休眠体,不是繁殖体孢子——生殖细胞5.细菌的群体特征——菌落由单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度后,形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体叫菌落。菌落是鉴定菌种的重 要依据。 菌落的大小、形状、边缘状况、质地、光泽、颜色及透明度等是微生物分类、鉴定的重要依据。 ·菌苔:固体培养基表面众多菌落连成一片,呈片状,这就是菌苔。 ·平板:即培养平板,指盛有固体培养基的平皿各种类型的细菌菌落二、放线菌1、结构:单细胞原核分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)应用: 微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是由放线菌产生的。如:链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素 三、真菌(真核细胞)酵母菌、霉菌、大型真菌(蘑菇、木耳等)1.单细胞真菌——酵母菌:三、真菌(真核细胞)2.丝状真菌——霉菌腐生生活直立菌丝 营养菌丝各种类型的霉菌菌落酵母菌和霉菌青霉3.大型真菌各种类型的放线菌菌落 各种类型的酵母菌菌落四大类微生物区分要点菌落形态:1.若菌落表面湿润薄而小——细菌厚而大——酵母菌2.若菌落表面干燥密而小——放线菌松而大——霉菌 不同微生物菌落的特点细菌:湿润,粘稠,易挑起 放线菌:干燥,多皱,难挑起,菌落较小,多有色素酵母菌:湿润,粘稠,易挑起,表面光华, 比细菌的菌落大而厚.霉菌:菌丝细长,菌落疏松,成绒毛状、蜘蛛 网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽, 不易挑起。 同类微生物的不同物种,菌落的特点也不相同。草履虫原生生物界:藻类、原生动物类、原生菌类原核生物(原核细胞构成)真菌原生生物有细胞结构真核微生物(真核细胞构成)微生物的种类病毒没有细胞结构微生物的共同特点(小、多、快、强、广)(1)体积小,面积大 (细胞以微米、纳米来计算)? (2)吸收多,转化快(3)生长旺,繁殖快 如大肠杆菌(4)适应强,易变异 如感冒病毒(5)分布广,种类多(二)培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。合成培养基天然培养基分类:基本培养基选择培养基鉴别培养基培养基类型固体培养基液体培养基半固体培养基按成分分按功能分按物理状态分天然培养基与合成培养基A.合成培养基: 根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低 缺点: 缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。 人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如血清)。————半合成培养基血清中含有:①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)②多种金属离子;③激素;④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原蛋白等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成分B.天然培养基: 天然培养基:有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。优点:营养成分丰富,培养效果好缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染。 A.鉴别培养基 利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,
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