细胞培养室的设备及准备工作.pptxVIP

培养细胞生长的条件;细胞培养实验室设置与设备;; 实验准备; 压力蒸汽消毒器：湿热消毒，用途广 电热干燥箱：干热消毒（160 ℃ ，2小时）。主要用干玻璃 器皿消毒 滤器：过滤除菌：大多数培养用液，如人工合成培养基、血清、 酶液等均采用滤过法除菌 超净工作台：为细胞操作提供无菌环境 紫外灯 ：紫外线消毒。 主要用于培养室空气、操作台、塑料 培养皿和培养板等表面消毒 ;超净台;Detergent ;Filter; CO2培养箱;Inverted microscope;A simple inverted microscope is essential so that cultures can be examined in flasks and dishes. It is vital to be able to recognize morphological changes in cultures since these may be the first indication of deterioration of a culture. ;Liquid N2 / deep freezer Invariably for continuous and finite cell lines, samples of cultures will need to be frozen down for storage. They should be frozen in phase of growth with a suitable preservative, usually dimethylsulfoxide (DMSO). ;酶标仪 微孔板震荡器;Distilled water pure water;A double distilled or reverse osmosis water supply is essential for preparation of media, and rinsing glassware. ;Refrigerators and freezer;Refrigerators and freezer (-20 oC) Both items are very important for storage of liquid media at 4oC and for enzymes (e.g., trypsin) and some media components (e.g., glutamine and serum) at -20 oC. ;Suitable container;细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒;清洗;玻璃器皿的清洗;浸泡 初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物软化或被溶掉 新的初次使用的玻璃器皿，在生产及运输过程中，玻璃表面带有大量的干固的灰尘，且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等 先用自来水简单刷洗，然后用5％稀盐酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质 再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的蛋白质，干固后不易洗掉 用后立即浸入水中，要求完全浸入，不能留有气泡或浮在液面上;刷洗： 用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的杂质 刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度;浸酸： 玻璃器皿浸泡到清洁液中 清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用，而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质 浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或器皿露出清洁液面 浸泡时间：一般为过夜，不应少于6 小时 配制洗液时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分 配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色;冲洗 在使用后，刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或清洁液的残迹 最好用洗涤装置 如用手工操作 需流水冲洗十次以上，每次水须灌满及倒干净，最好用蒸馏水清洗3-5 次，晾干备用;胶塞的清洗;塑料制品的清洗;消毒;消毒灭菌方法;细胞培养常用物品;水;培养基（培养液）是维持体外细胞生存和生长的溶液，分天然培养基和合成培养基。 天然培养基： 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限; 成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染。 ;细胞培养基;细胞培养基