基因工程疫苗.docVIP

基因工程药学大作业 第 PAGE 7 页 共 NUMPAGES 7 页 基因工程疫苗概述 1 绪论 现代意义的疫苗，就是一种使用抗原、通过诱发机体产生特异免疫反应、预防和治疗疾病或达到特定医学目的的生物制剂。目前用于人类疾病防治的疫苗有20多种，根据预防对象可分为病毒疫苗和细菌疫苗，根据技术特点则分为传统疫苗和新型疫苗。传统疫苗主要包括减毒活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗；新型疫苗以基因工程疫苗为主，主要包括：基因工程疫苗（基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗及蛋白工程疫苗）、遗传重组疫苗、合成肽疫苗、抗独特型抗体疫苗以及微胶囊可控缓释疫苗等。 人类自1796年第一次成功使用疫苗到现在已经制备了近60余种不同的疫苗(表1),这些疫苗使人类最终免除了天花的灾难,同时每年还使数以百万的人免遭多种疫病的侵害。 表1 　主要人用疫苗的发明时间及成份 时间 疫苗 成份 1796 年 天花疫苗 异源病毒 1885 年 狂犬病疫苗 灭活病毒 1897 年 鼠疫疫苗 弱毒/灭活细菌 1920 年 伤寒疫苗 灭活细菌或多糖 1923 年 白喉疫苗 灭活毒素 1926 年 百日咳疫苗 灭活毒素 1927 年 卡介苗 弱毒菌 1927 年 破伤风疫苗 灭活毒素 1935 年 黄热病疫苗 弱毒病毒 1936 年 流感疫苗 灭活病毒 1955 年 脊髓灰质炎注射疫苗 灭活病毒 1962 年 脊髓灰质炎口服疫苗 弱毒病毒 1964 年 麻疹疫苗 弱毒病毒 1967 年 腮腺炎疫苗 弱毒病毒 1970 年 风疹疫苗 弱毒病毒 1981 年 乙肝疫苗 蛋白质 1985 年 流感嗜血菌疫苗 多糖 1990 年 甲肝疫苗 灭活/弱毒病毒 基因工程疫苗 即DNA 疫苗（遗传工程疫苗），是用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物或重组体本身（多数无毒性、无感染能力、有较强免疫原性）制成的疫苗。基因工程疫苗就是用基因工程方法或分子克隆技术分离出病原的保护性抗原基因, 将其转人原核或真核系统使其表达出该病原的保护性抗原, 制成疫苗或者将病原的毒力相关基因删除掉或进行突变,使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗或突变苗,基因工程疫苗只含有病原的部分组成,而常规疫苗往往是一个完整的病原体,因此基因工程疫苗的最大优点是安全性好, 对致病力强的病原更是如此。与传统疫苗相比,基因工程疫苗还具有以下优点：第一,可以降低生产成本,更廉价更大批地生产。第二,易于区分感染动物和免疫动物, 由于荃因工程苗中只含有病原的1-2 种蛋白成份,或者缺失某一蛋白成份, 因此通过检测野毒中含有, 而基因工程疫苗中没有的病毒蛋白的抗体可以方便地从免疫动物中区分出野毒感染者。第三,利用活载体可制成多价疫苗,达到一针防多病的目的。 目前用于防制人和动物传染病的疫苗,无论是灭活苗、弱毒苗,还是亚单位苗,其研制都是以大量培养致病微生物为基础的,这不仅给疫苗的制造带来了局限性,同时在疫苗的安全性、免疫性能、产量及保存等诸多方面存在缺陷, 如病原微生物灭活不彻底,导致强毒散播；致弱的疫苗返强等。近几年发展起来的基因工程技术为研制新的更为有效的疫苗带来了希望, 已成为目前生物技术的热点之一。 根据基因工程疫苗研制的技术路线和疫苗组成的不同,目前可分为四大类：①基因工程亚单位苗；②基因缺失苗或突变苗；③活载体苗；④DNA疫苗。各种基因工程疫苗的性质见表2。 表2 几种基因工程苗的特性比较 项目 基因工程亚单位苗 基因缺失或突变苗 活载体苗 DNA疫苗 免疫效果 较差 好 好 较好 免疫次数 多次 一次 一次 二次 佐剂 需要 不需要 不需要 需要 安全性 好 好 较好 好 稳定性 强 强 较强 较强 保存期 长 长 较长 较长 研制周期 较长 较长 长 短 2.1 亚单位疫苗 基因工程亚单位疫苗（subunitvaccin）又称重组亚单位疫苗（Recombinant Subnit Vaccines），它通过DNA重组技术，在受体菌或细胞中高效表达编码病原微生物保护性抗原基因（protective antigen），将相应佐剂加入分泌的保护性肽段中乳化制成疫苗。该疫苗仅含有病原体的部分抗原，使其免疫反应为单一蛋白质所诱导。其具有安全性好，便于生产等优点。在研制亚单位疫苗时，首要任务是选取目的基因，病原体保护性抗原的编码基因或具有协同保护功能的基因为优先选择，如病原体表面糖蛋白编码基因。但对于易变异的病毒（如A型流感病毒） 则选择各亚型共有的核心蛋白基因序列， 然后在PCR对目的基因扩增后， 选择合适的表达系统来表达基因产物。目前原核表达系统（如大肠杆菌）是比较成熟的，但表达出的蛋白抗原性较差； 而真核系统（如酵母）的表达产物好，有巨大发展潜力。最后