产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分离鉴定及酶学性质.pdf

第32卷 第3期 食 品 科 学 技 术 学 报 Vol郾32 No郾3 2014年5月 Journal of Food Science and Technology May2014 43 doi:10.3969/ j.issn.2095鄄6002.2014.03.008 文章编号:2095鄄6002(2014)03鄄0043鄄05 引用格式:崔海洋,程仕伟,黄田红,等. 产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分离鉴定及酶学性质研究. 食品科学技术学报,2014,32 (3):43-47. CUI Haiyang,CHENG Shiwei,HUANGTianhong,et al. Screening and identifying ofBacillus amyloliquefaciens for cellulase production and its enzymatic characters. Journal of Food Science and Technology,2014,32(3):43-47. 产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分离鉴定及酶学性质研究 * 崔海洋,摇 程仕伟 ,摇 黄田红,摇 李秀娟,摇 杨立红,摇 陈国忠 (鲁东大学生命科学学院,山东烟台摇 264025) 摘摇 要:对一株产纤维素酶菌株进行分离鉴定,并对其酶学特性进行了初步研究. 刚果红染色法 筛选产纤维素酶菌株B16,采用形态观察、生理生化指标和16S rDNA确定其菌属来源,分析纤维素 酶的最适反应pH值和温度、酸碱和热稳定性、金属离子对酶活性的影响,最后考察纤维素酶系的 分布. 结果表明:筛选菌株为解淀粉芽孢杆菌,其较适反应温度为30 益,较适pH8郾0,在10~60 益 2+ 2+ 呈高稳定性,在pH 5 ~8 时稳定性较强,Mn 和Ba 是该酶的激活因子. 除微晶纤维素酶活力 (16郾39 U/ mL)稍弱外,滤纸酶(70郾37 U/ mL)、茁鄄葡萄糖苷酶(131郾55 U/ mL)、羧甲基纤维素酶 (307郾23U/ mL)活力均相对较高. 结果表明,该酶在饲料添加剂方面具有应用潜力. 关键词:纤维素酶;分离鉴定;解淀粉芽孢杆菌;酶学性质 中图分类号:TS235;Q814郾4摇 摇 摇 摇 摇 文献标志码:A 摇 摇 纤维素酶是由作用方式不同但能协同催化降解 中受到广泛重视. 本文通过对高产纤维素酶的一 纤维素的3类酶组成的酶系,可降解纤维素生成低 株细菌进行分离鉴定及催化特性研究,为后期发 [1] 聚糖或葡萄糖 . 包括作用于纤维素分子内部非结 酵生产及其在饲料添加剂方面的实际应用提供数 晶区的内切葡萄糖苷酶(又称羧甲基纤维素酶),作 据支撑. 用于线状分子末端的外切葡萄糖苷酶(又称纤维二 糖水解酶或微晶纤维素酶)和将纤维二糖水解成葡 1摇 材料与方法 萄糖的茁鄄葡萄糖苷酶[2-3]. 纤维素酶广泛应用于饲料、食品、纺织、造纸 1郾1摇 材料 和洗涤等行业[4 -5] ,作为一种绿色饲料添加剂,将 水杨素和3,5鄄二硝基水杨酸,上海生物工程公 饲料中的部分纤维素降解成可消化吸收的还原 司;微晶纤维素,Sigma 公司;细菌基因组抽提试剂 [6] [7-11] 盒,Axygen公司;EX Taq 酶和dNTP,TaKaRa;Marker 糖,提高饲料利用率 . 其营养机理 :补充内 源酶的不足,溶解植物细胞壁促进吸收;减低动物 DL5000,广州东盛科技公司. 其余试剂均为分析纯 胃肠道黏稠度,消除抗营养因子;降低有害微生物 或生物纯. 的附