人外周血单核细胞来源的树突状细胞的体外2＋2快速法培养及其鉴定.pdf

动 物 学 研 究 2008，Aug. 29(4) ：415-420 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research doi:10.3724/SP.J.1141.2008.04415 人外周血单核细胞来源的树突状细胞的体外 “2＋2”快速法培养及其鉴定 1, 3 2 1, 3 1, 3 1 1, * 陆小鹏 ，李 剑 ，孙正华 ，赵 娜 ，刘 洁 ，张华堂 (1. 中国科学院昆明动物研究所 免疫生物学实验室，云南 昆明 650223 ；2. 中国科学院昆明动物研究所 中心实验室， 云南 昆明 650223 ；3. 中国科学院研究生院，北京 100049 ） 摘要：以人浓缩白细胞来源的CD14＋单核细胞为前体，建立体外快速培养树突状细胞（dendritic cell, DC ）的 方法。采用密度梯度离心和MACS 磁珠分选系统，收集高纯度的CD14＋单核细胞；以rGM-CSF 、rIL-4 联合分化 2 天诱导不成熟DC ，再将分化后的细胞以rTNF-α、IL-1β、IL-6 、PGE2 共同活化2 天得到成熟DC 。流式细胞仪 检测结果表明，分化2 天的不成熟DC 具有吞噬能力，且表型HLA-DR 、CD40、CD80 表达在80 ％以上，CD83、 CD86 基本不表达，成熟后的DC 能够激活T 细胞增殖，HLA-DR 表达增高，CD83、CD86 表达占85 ％。 关键词：单核细胞； 树突状细胞；“2 ＋2”快速法 中图分类号：Q25 文献标识码：A 文章编号：0254-5853-(2008)04-0415-06 A “2 ＋2 days” Fast Protocol for the Generation of Dendritic Cells from Human Blood Monocytes 1, 3 2 1, 3 1, 3 1 1,* LU Xiao-peng , LI Jian , SUN Zheng-hua , ZHAO Na , LIU Jie , ZHANG Hua-tang (1. Immunobiology Lab, Kunming Institute of Zoology, the Chinese Academy of Science, Kunming 650223, China; 2. Core Faculty, Kunming Institute of Zoology, the Chinese Academy of Science, Kunming 650223, China; 3. Graduate School of the Chinese Academy of Science, Beijing 100049, China) Abstract: A “2 ＋2 days” fast protocol for the generation of dendritic cells（DC ） from high purity human monocytes in vitro has been established. During the 2-step differentiation and activation process, we demonstrated that 2 days of culture with GM-CSF and IL-4 were sufficient