人卵母细胞样细胞体内分化模型的建立.pdf

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394 生 物 工 程 学 报 俞晓丽 等/人卵母细胞样细胞体内分化模型的建立 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn March 25, 2015, 31(3): 394−402 DOI: 10.13345/j.cjb.140314 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 组织工程与细胞培养 人卵母细胞样细胞体内分化模型的建立 1,2 1 1 1 1 1 俞晓丽 ,王宁 ,马洋洋 ,万千惠 ,秦明鸣 ,王华岩 1 西北农林科技大学动物医学院 陕西省干细胞工程技术研究中心,陕西 杨凌 712100 2 宁夏医科大学人体解剖学与组织胚胎学系 生育力保持教育部重点实验室 宁夏生殖与遗传重点实验室,宁夏 银川 750004 俞晓丽, 王宁, 马洋洋, 等. 人卵母细胞样细胞体内分化模型的建立. 生物工程学报, 2015, 31(3): 394–402. Yu XL, Wang N, Ma YY, et al. Generation of human oocyte-like cell differentiation in vivo. Chin J Biotech, 2015, 31(3): 394–402. 摘 要: 干细胞通过诱导培养,在体外能够分化为卵母细胞样细胞 (Oocyte-like cell ,OLC) ,将其置于体内环 境能够有效地改善 OLC 的质量和发育能力。通过检测猪卵泡液中激素和Bmp 15 蛋白的含量,选取了中等卵 泡的卵泡液对人羊水干细胞进行体外诱导培养,10 d 后,经实时定量PCR 检测发现,早期生殖细胞样细胞团 高表达生殖基因oct4 和重新甲基化转移酶基因dnmt3b 。将这些细胞团用猪卵泡膜包裹后形成移植物,移植到 小鼠肾被膜下。1 个月后取出移植物,发现移植物内的细胞在形态上,不仅与正常的卵母细胞极为相似,而且 还表达生殖细胞和卵母细胞特异标记基因 (oct4 、nanog 、stella 、ifitm3 、dazl 、nanos3 、bmp15 和gdf9) 。证明 技术体系能够有效改善OLC 的形成和发育能力。 关键词: 人羊水干细胞,卵母细胞样细胞,骨形成蛋白 15,卵泡液,分化 Received: June 6, 2014; Accepted: October 28, 2014 Supported by: National Natural Science Foundation of China (No. , Scientific Research Project of Ningxia Medical University (XT201412). Corresponding author: Huayan Wang. Tel: +86-29 E-mail: hhwang101@163.com 国家自然科学基金 (No. ,宁夏医科大学校级项目 (XT201412) 资助。 网络出版时间:2015-01-13 网络出版地址:/kcms/detail/11.1998.Q1353.001.html

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