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- 2019-11-16 发布于江西
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实验1.2 培养基的配制
学习目标:
掌握培养基的配制的过程
理解无菌操作
组内合作:
1.说出培养基配制流程;
2.讨论消毒与灭菌的区别,小结常用灭菌方法。
1.计算 2.称量
牛肉膏
5.0g
蛋白胨
10.0g
NaCl
5.0g
H2O
1000mL
琼脂
2.0g
3.熔化 4.调节pH
5.分装
6.灭菌
灭菌——高压灭菌
1.05kg/cm2、121℃、15—30min
灭菌锅
高压灭菌作用:杀死所有活的微生物及芽孢
(补充:倒“平板”)
超净工作台
倒平板
约50℃
防止培养皿盖上的水珠滴落污染培养基。
灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
7.恒温培养(恒温培养箱)
培养基的配制
加热熔化琼脂(搅拌)
倒入三角烧瓶,与其他器具一起放入灭菌锅高压灭菌
定容
调节PH至
7.2-7.4
(一般需要作无菌检查)
核心:保证无菌操作
超净工作台、酒精灯火焰旁操作
分析和讨论
1.在配制培养基时,当琼脂完全融化后为什么要用热水定容至200mL?
2.将三角烧瓶中的培养基分装至培养皿中时,为什么要用酒精灯火焰先烧一下三角烧瓶的瓶口?
1.如何检验培养基是无菌的?
2.常用灭菌方法有哪些?
将未接种的培养基放在恒温培养箱中适宜条件下培养2-3d,如果无菌落产生,则培养基是无菌的。
高压(蒸气)灭菌
灼烧灭菌
用于培养基、
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