化瘀通络方对肺癌微环境树突状细胞的影响及其相关机制.pdf

·４１０· ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｒａｃｔｉｃａｌＯｎｃｏｌｏｇｙＶｏｌ．３４　Ｎｏ．５２０１９　ｗｗｗ．ｓｙｚｌｚｚ．ｃｏｍ ·基础研究 · 化瘀通络方对肺癌微环境树突状细胞的 影响及其相关机制 １，２＃ １＃ １ １ １ 毛　维 ，王　瑞 ，华　莎 ，孙连庆 ，刘永惠 （１．西安交通大学第一附属医院中医科，陕西 西安７１００４６；２．咸阳市中心医院肿瘤内科，陕西 咸阳７１２０００） 摘要： 目的　研究化瘀通络方对肺癌微环境中树突状细胞株ＤＣ２．４的影响及与Ｗｎｔ／ｃａｔｅｎｉｎ信号通路之间 β 的关系。方法　成年ＳＤ大鼠皮下注射０．０１％肾上腺素，１次／ｄ，连续７ｄ，形成血瘀证模型大鼠后，分别注射低 （６４ｇ／ｋｇ）、中（１２．８ｇ／ｋｇ）和高剂量（２５．６ｇ／ｋｇ）化瘀通络方药液获取含药血清。用低、中和高剂量含药血清以及 Ｗｎｔ／ｃａｔｅｎｉｎ通路激活剂ＳＢ２１６７６３和抑制剂ＸＡＶ９３９分别处理与Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞上清液共培养４８ｈ的ＤＣ２．４细 β 胞４８ｈ，并设无药物处理的空白对照组和无药物处理且无肺癌细胞上清液共培养的阴性对照组。倒置显微镜下观 察细胞形态学变化，ＭＴＴ法检测细胞存活率，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测 ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达。结果　加入肺癌细胞上清液 β 的ＤＣ２．４细胞数量减少，细胞呈不规则菱形、梭形，细胞周围树突状毛刺较少，有少量漂浮的死细胞。加含药血清 及ＳＢ２１６７６３作用后ＤＣ２．４细胞变大，树突状毛刺增多，细胞内可见点状颗粒，与典型的成熟的树突状细胞株形态 相似；ＳＢ２１６７６３及高、中、低剂量含药血清作用的细胞存活率均高于空白对照组［（１０４．２０±２．８２）％、（１０７．８６± ２８５）％、（１０３．９７±２．４１）％、（９９．０４±２．８０）％ｖｓ（５６．２５±２．７８）％，均Ｐ＜０．０５］，随着药物浓度增加，细胞存活 率增高。加入肺癌上清液后ＤＣ２．４细胞 ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达下降（Ｐ＜０．０５），而经过化瘀通络方作用后 ｃａｔｅｎｉｎ β β 蛋白表达升高，且随着含药血清剂量增加，ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达上调（均Ｐ＜０．０５）。结论　肺癌微环境对ＤＣ２．４细 β 胞生长发育有抑制作用。化瘀通络方对肺癌微环境中ＤＣ２．４的形态改变和数量抑制具有拮抗作用，其机制可能与 激活Ｗｎｔ／ｃａｔｅｎｉｎ信号通路有关。 β 关键词： 肺肿瘤／药物疗法；活血祛瘀；通络；树突细胞；Ｗｎｔ信号通路 中图分类号：Ｒ７３４．２；Ｒ７３０．５３　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００１１６９２（２０１９）０５０４１００７ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｈｕａｙｕｔｏｎｇｌｕｏｄｅｃｏｃｔｉｏｎｏｎｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓｉｎｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｅｄｍｅｃｈａｎｉｓｍ １，２＃ １＃ １ １ １ ＭａｏＷｅｉ ，ＷａｎｇＲｕｉ，ＨｕａＳｈａ，ＳｕｎＬｉａｎｑｉｎｇ，ＬｉｕＹｏｎｇｈ