氨基酸纸层析糖旋光度测定an.pptxVIP

第1页/共24页实验目的：1.学习层析（色谱）分离技术。2.学习旋光度测定技术。第2页/共24页一、氨基酸的纸色谱 色谱法：根据不同溶质在固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，在随着流动相经过固定相时，在两相之间形成多次平衡，被流动相带动移动的速度不同，达到分离效果的方法。固定相：固定不动，对样品产生保留作用的物质。流动相：带动样品，经过固定相的物质。色谱过程的实质：是样品在固定相中吸附与解析的过程。第3页/共24页色谱法分类按分离机制，可分为：吸附色谱：分子在两相中吸附性能不同，进行分离分配色谱：分子在两相中分配系数不同，进行分离离子交换色谱：分子在两相中离子交换性能不同，进行分离体积排阻色谱：体积大的留在固定相的小孔内，体积小的先 流出。亲和色谱：分子在两相中亲和力不同，进行分离。电泳色谱、电色谱：离子在电场中移动的速度不同进行分离第4页/共24页按操作方式不同，又可分为：柱色谱气相色谱高效液相色谱薄层色谱纸色谱等固定相组分第5页/共24页纸色谱：为分配色谱，滤纸为载体，固定相为滤纸上的水分，流动相（展开剂）为用水饱和过的有机溶剂。操作技术：上行法、下行法、环行法第6页/共24页纸色谱、薄层色谱的一般操作步骤第7页/共24页1.制板（纸）第8页/共24页滤纸芯儿的制作将一个1.5cm 长、1cm 宽的滤纸，剪成扇子状，并卷起来第9页/共24页在滤纸中央