《粗蛋白质测定1 》-精选课件(公开).pptVIP

饲料常规分析概述 饲料养分概略分析：又称Weende饲料分析体系，由100多年前德国科学家Henneberg和Stohmann创立 内容：水分（moisture）、粗灰分（ash）、粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE） 、粗纤维（CF）、无氮浸出物（NFE） 二、操作步骤1、试样的消煮：（1）称取试样0.5～１g，准确至0.0002 g，放入消化管中。 （2）加入催化剂：硫酸钾6g，硫酸铜0.4g 。 （3）加入浓硫酸12ml,于420℃下在消煮炉上消化，直至呈透明的蓝绿色，再继续加热至少0.5h。 2、氨的蒸馏 （1）、半微量蒸馏法 （2）、常量蒸馏法（下面是国产半自动定氮仪的蒸馏过程） （3）蒸馏步骤的检验 精确称取0.2g硫酸铵，代替试样，按氨的蒸馏步骤进行操作，测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2%，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。 3、滴定 蒸馏后的吸收液立即用盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。 三、空白测定 称取蔗糖0.5g，代替试样，按二操作步骤进行空白测定，消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积不得超过0.2ml。消耗0.02mol/L盐酸标准溶液体积不得超过0.3 ml。 四、测定结果的计算 1、半微量蒸馏法 粗蛋白质（%）= ——滴定试样时所需标准酸溶液体积，mL； ——滴定空白时所需标准酸溶液体积，mL； c ——盐酸标准溶液浓度，mol/L m ——试样质量，g； V ——试样分解液总体积，mL； ——试样分解液蒸馏用体积，mL； 2、常量蒸馏法 粗蛋白质（%）= 五、2300型自动定氮仪的操作方法 1、试样的消煮（与半自动定氮仪相同） 2、氨的蒸馏和滴定由定氮仪自动完成。 一、准备工作 1、检查各试剂桶的试剂是否适量，打开冷凝水龙头。 2、安放空消化管到仪器上，关上安全门，打开电源开关，待仪器自检（此时不能操作任何按键）完毕，进入手动操作菜单。 3、选择添加吸收液菜单项，确认（回车）3~5次，观察排除的吸收液颜色稳定。4、检查滴定系统，如有气泡，选择滴定菜单项，排气泡；如无气泡，选择蒸馏菜单项，确认，2~4min后，停止蒸馏（预热） 5、按分析程序键进入分析工作菜单（必要时修改设置程序后再进入分析菜单）。6、选择合适的分析程序，选择BLANK结果输出，做空白测定。7、测定取得连续3个稳定的空白值。8、转到结果菜单单项，选择合适的测定结果输出（注：一般可先做回收率测定） 二、测定工作1、开始样品的测定程序，在仪器上选定分析程序，并输入样品质量。 2、消化好的样品，放在消化管架上。待仪器处于准备测样状态（READY），把消化好的样品消化管装上仪器，关上安全门，仪器自动进行蒸馏滴定。3、等待3~4min后，仪器分析完毕，显示　“READY”，打开安全门。 4、取出分析完的消化管，放回消化管架。 5、输入样品质量（最好在上一个样品蒸馏过程中输入,以节省测定时间）装上新消化管，重复2~4步操作，待全部样品分析完毕，准备关机。 6、设定清洗程序，取空消化管上机，关上安全门。 7、清洗几分钟后，取出消化管，关断电源，做日常清洁保养。 8、使用该仪器时必须注意： （1）每次开机后，必须把管道中的气泡排除完毕后，才能进行样品测定，否则可能造成测定结果不准确，甚至测定失败。 （2）关安全门之前，必须确认样品质量已输入面板上，消化管顶部与蒸馏头密封，不漏气。 （3）碱桶、吸收液桶、蒸馏水桶要保持有一定量的液体（最少约1/5桶），否则应及时补充。 （4）本仪器是贵重仪器，未经本实验室老师培训，不得擅自开机。 六、讨论 1、消煮时应注意的问题 （1）消化的温度 （2）消化的时间及终点颜色的判断 2、蒸馏时应注意的问题 3、测定粗蛋白质时，哪些重量和体积要准确？哪些则不需要很准确？ * A 、称量纸在天平上调零 C、 天平调零后，把样本小心倒入消化管中 B 、 在称量纸上称样本 D 、再称称量纸 A、 在普通天平上称硫酸钾6g B、 在普通天平上称硫酸铜0.4g C、 已称好样本和催化剂的消化管 注：蔗糖可在普通天平上称重(0.5g) 消化过程颜色变化：黑色→黑褐色→红褐色→黄绿色→蓝绿色（终点颜色） 消煮过程会产生大量二氧化硫，需在通风橱内进行消煮 蒸汽发生器 反应室 ↖ 图示：半微量水蒸汽蒸馏仪 蒸气发生器 反应室 冷凝管 A 、放入消化管 B 、加入过量的碱，使消化液变黑；此时锥形瓶中的硼酸为暗红色。 C、 硼酸吸收氨后变蓝绿色 D 、使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min 。 A、 终点颜色过红 B、 未滴定盐酸前的颜色 C、终点颜色较好 分析程序