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选修一 生物技术实践备考填空 PAGE PAGE 1 基础课时案39　微生物的培养和利用 2016备考·最新考纲 1．微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。 一、微生物的实验室培养 1．培养基 (1)eq \a\vs4\al(成分) eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物,质以及氧气的需求)) (2)分类eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(固体培养基：含凝固剂,液体培养基：不含凝固剂)) 2．无菌技术 (1)关键：防止 的入侵。 (2)不同对象的无菌操作方法[连一连] 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 eq \x(计算)→eq \x(称量)→eq \x(溶化)→eq \x(灭菌)→eq \x(倒平板) (2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由 的肉眼可见的 ，即可获得较纯的菌种。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤： 。 ③常用的微生物接种方法有两种 a．平板划线法：是通过 在琼脂固体培养基表面 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b． 法：是将菌液进行一系列的 ，然后将 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种，可以采用 的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用 的方法。 深度思考 如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考 (1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？ (2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？ 提示　(1)获得效果A的接种方法为 法，获得效果B的接种方法为 法。 (2)最可能的原因是菌液浓度过高或 在划下一区域前未将接种环灭菌；采取的措施是增大 或每次划新区域前先将接种环灭菌。 二、微生物的筛选和计数 1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)分离原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成 ，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起 作用。 (2)统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用 法。 (3)实验流程：土壤取样→ →微生物的培养与观察→细菌的 。 2．分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶 ①组成：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。 ②作用 纤维素eq \o(――→,\s\up11(C1酶),\s\do4(Cx酶)) eq \o(――→,\s\up7(葡萄糖苷酶)) (2)纤维素分解菌的筛选 ①原理 　　　　　　 　纤维素分解菌 　　　　　　 　　　↓ eq \b\lc\ \rc\}(\a\vs4\al\co1(刚果红,纤维素))→ eq \o(――→,\s\up7(纤维素酶))红色消失，出现 ②筛选方法： 染色法，即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 ③培养基：以 为唯一碳源的选择培养基。 ④实验流程 土壤取样：富含 的环境 ↓ 选择培养：用 培养，以增加纤维素分解菌的浓度 ↓ ：制备系列稀释液 ↓ 涂布平板：将样品涂布到 的培养基上 ↓ 挑选产生 的菌落 考点一　微生物的实验室培养　 1．消毒和灭菌的区别 项目 概念 常用方法 应用的范围 消毒 使用较为温和的物理或化学方法，仅 或内部一部分对人体有害的微生物(不包括 和 ) 煮沸消毒法：在100 ℃下煮沸5～6 min 一般物品 巴氏消毒法： ℃下煮30 min或在80 ℃下煮15 min 一些不耐高温的液体，如牛奶 化学药剂消毒法 如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等 紫外线消毒法：30 W紫外灯照射30 min 接种室 灭菌 使用 方法杀死物体内外所有的微生物(包括 和 ) 灼烧灭菌：酒精灯火焰