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动物生物化学实验讲义 东北农业大学 动物生化教研室 实验项目1 γ–球蛋白的分离 实验项目2 γ–球蛋白含量测定（光度分析法） 实验项目3 凝胶柱层析法（γ–球蛋白纯化） 实验项目4 SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS–PAGE） 实验项目5 动物组织中DNA的制备 实验项目6 多聚酶链反应（PCR扩增反应） 实验项目7 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 实验项目8 转氨酶GPT活性的测定 实验项目9 氨基酸薄层层析 实验项目10 琥珀酸脱氢酶及丙二酸的抑制作用 实验一 γ–球蛋白的分离 【 原 理 】 中性盐 （如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠、硫酸镁等）对球状蛋白质的溶解度有显著影响。随着中性盐浓度的增加，离子强度也增加。当溶液离子强度增加到一定数值时，溶液中蛋白质的溶解度开始下降。离子强度增加到足够高时，蛋白质可从水溶液中沉淀出来，这种现象叫做盐析。各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的高浓度盐溶液来沉淀分离各种蛋白质。 蛋白质是一种生物大分子，它具有不能通过半透膜的性质。透析就是利用这种性质使之与其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。本次实验应用的是脱盐透析，即盐析后，将含大量盐类的蛋白质溶液放在半透膜的袋内，再将透析袋浸入蒸馏水中。经过一段时间，袋内的盐类浓度即逐渐降低。若经常更换袋外的液体，最后即可使袋内的蛋白质溶液中