植物油中苯并芘含量测定研究_吴钟玲.docVIP

文章编号:1006-446X(201206-0029-05 植物油中苯并芘含量测定研究 吴钟玲1何仲强2陈树东1林晓佳1陆智峰1吴志谊1郭茂章1 (1．广州市质量监督检测研究院,国家加工食品质量监督检验中心(广州,广东广州510110;2．广州市标准化研究院,广东广州510110 摘要:为建立固相萃取－液相色谱法测定植物油中苯并芘的检验方法,将植物油中的苯并芘用 中性氧化铝固相萃取小柱萃取和净化后用反相色谱柱分离,荧光检测器进行了检测。结果表明, 苯并芘质量浓度在0.001 0.1μg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系,相关系数r= 0.9999,检测限为0.4μg/kg,回收率在88.1% 94.2%之间,RSD为2.42%,操作简便,对样 液的净化效果好,结果准确可靠。 关键词:苯并芘;固相萃取;反相高效液相色谱;植物油 中图分类号:O657.72文献标识码:A 苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物,是一种强致癌物质,在生产植物油的过程中可能因环境污染或原材料带入或加工时温度过高而产生。植物油是人类食用频率最高的食物之一,而植物油中苯并芘的测定则是食品检验机构最常见的检测项目之一。因此建立一种快速准确和科学可靠的植物油中苯并芘含量的检测方法具有积极意义。目前测定食品中苯并芘较为先进的检测手段主要是高效液相色谱法和气相色谱－质谱联用法。高效液相色谱法因其灵敏度高,分离效果好,重现性好而广泛被采用[1－5]。我国近年来制订相关的国家标准和行业标准也是采用高效液相色谱法[6－7]。但在测定植物油中苯并芘的前处理技术还不理想,如在《GB/T22509－2008》国家标准中测定植物油的前处理较为繁琐。复杂的前处理不仅耗时耗力、污染环境,且容易引入较多的误差和不确定度,影响结果的准确性。近来有报道用溶剂直接稀释植物油样品上机进行分析[5],操作非常简单快速,且重现性好。但因油样未经净化处理,从而污染色谱柱而缩短柱的使用寿命,甚至会污染仪器的流路系统而损坏仪器,也可能因杂质的存在干扰检测结果的准确性。本文提出的固相萃取法作为测定植物油中苯并芘的前处理,旨在建立一种更为科学快速和准确可靠的检验方法。 1材料和方法 1.1材料试剂与仪器 植物油(市售。 正己烷、丙酮,均为分析纯,广州化学试剂厂;二次蒸馏水;苯并芘标准(含量≥99%美国Sigma公司;中性氧化铝固相萃取小柱(6mL加装2g,上海安谱公司;洗脱剂:(250mL 丙酮+5mL水;淋洗液:250mL正己烷+5mL乙酸乙酯。 LC－2010AT型高效液相色谱仪(LCsolution色谱工作站,CBM－20A型系统控制器,RF－收稿日期:2012-05-02 作者简介:吴钟玲(1979—,女,广东广州人,硕士研究生,工程师,主要研究食品检测。 10AXL型荧光检测器,SIL－20A型自动进样器,日本Shimadzu公司;24DL固相萃取装置,美国Waters公司;112型氮吹仪,美国Oaganamation Associates Juc公司。 1.2标准溶液的配制 准确称取10.0mg苯并芘标准品于100mL棕色容量瓶中,用甲苯溶解并定容。该储备液质量浓度为100μg/mL。然后再用丙酮分别稀释成0.001、0.005、0.010、0.025、0.050、0.100μg/mL6个标准系列质量浓度。 1.3样品的前处理 把中性氧化铝固相萃取小柱装入固相萃取装置中。准确称取1g植物油样于10mL比色管内,加入约8mL正己烷后加盖充分摇匀。分次加入预先装好的固相萃取小柱中,调节1mL/min 的流量让其滴完,再用10mL淋洗液淋洗,洗毕,弃去全部透过液。淋洗后的固相萃取小柱用洗脱剂进行洗脱,用20mL试管收集大约10mL洗脱液,放到氮吹仪中在35?水浴的条件下浓缩到体积略小于1mL,取出用丙酮定容至1mL,过0.45μm滤膜,待测定。 1.4色谱条件 色谱柱:Diamonsil C18(250mm?4.6mm,5μm;荧光检测器参数设定:激发波长384 nm,发射波长406nm;柱温35?;进样量:20μL;流量:1mL/min;流动相:V(乙腈+ V(水=88+12。 在上述色谱条件下,苯并芘标准色谱图见图1。 图1苯并芘的标准色谱图 Fig1Chromatogram of benzo(apyrene standard 2结果与讨论 2.1样品的前处理 本法是利用中性氧化铝对苯并芘的吸附作用远大于对油脂吸附这一因素来萃取和净化待测目标化合物。淋洗液把吸附较弱的油脂清洗后,苯并芘能定量地被保留下来,然后用洗脱剂洗脱。洗脱剂由丙酮和少量水组成,因萃取小柱中的中性氧化铝吸水后脱活,对苯并芘的吸附能力大幅下降,加上苯并芘易溶于丙酮而被洗脱出来,从而达到萃取和净化的目的。 为了优化萃取和净