高通量筛选蛋白质突变体库方法的研究进展.docVIP

　上海农业学报　2004,20(2):20～23 　ActaAgriculturaeShanghai 文章编号:100023924(2004通量筛选蛋白质突变体库方法的研究进展3 黄国庆1,2)　姚泉洪2)32)3(1)浙江大学生命科学学院,杭州310012;上海市农业遗传育种重点实验室,上海市农业科学院生物技术研究中心,上海201106) 摘　要　定向进化已经被广泛用于修饰和加强蛋白质性能的研究。蛋白质突变体库筛选方法的改变和完 善进一步加强了定向进化技术在理解和设计新蛋白质实验中的运用。近年来报道了许多新的高通量筛选方法, 这些方法已经越来越多地用于蛋白质工程的研究,并且解决了此领域中一些具有争论性的前沿问题。 关键词　定向进化;突变体库;高通量筛选;流式细胞术 中图分类号:S188;Q785　　　　文献标识码:A 随着蛋白质构象预测、结构分析和定点突变方法研究的不断深入,加速了人们对蛋白质结构和功能之间相互关系的理解[1]。然而,除了少数成功的实例外,非常困难。因此,在工业和医药方面,得到广泛的关注。在农业生物技术研究领域,,主要包括:良、饲用氨基酸、4,包括高丰度蛋白质突变体库的,使得表达特定功能的克隆优先繁殖,。、抗体、,如化学诱变和易错PCR[5]。此外,近年来发展的DNA改组(DNAshuffling)[6]、过渡模板随机嵌合(randomchim