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第四章氧的传递与供需 氧是一种难溶于水的气体，在25℃，1×105Pa条件下，氧在纯水中的溶解度仅为1.26mmol/L，空气中的氧在纯水中的溶解度更低（0.25mmol/L）。培养基因含有大量的有机和无机物质，氧的溶解度比水中还要低。这就决定了大多数微生物深层培养需要适当的通风条件，才能维持一定的生产水平。 4.1 细胞对氧的需求 比耗氧速率（ ）: 单位质量的细胞（干重）在单位时间内消耗氧的量，（也称呼吸强度）。 当氧是限制性基质时，比耗氧速率 4.1 细胞对氧的需求 摄氧率(OUR )：单位体积培养液在单位时间内消耗氧的量。摄氧率与比耗氧速率有以下关系: 临界溶氧浓度：当氧为限制性基质时，维持细胞正常生长繁殖的最低氧浓度称为临界溶氧浓度。微生物的临界氧浓度大约是饱和浓度的1％-25％。 氧在培养液中的溶解度很低，但在培养过程中不需要使溶氧浓度达到或接近饱和值，而只要超过某一临界氧浓度即可。 细胞生长对比耗氧速率的影响 在分批培养过程中，在对数生长初期，比耗氧速率达最大值。但此时细胞浓度尚很低，摄氧率并不高，随着细胞浓度的迅速增高，培养液的摄氧率也迅速增高，在对数生长期的后期达到峰值。对数生长阶段结束，比耗氧速率下降，虽然此时细胞浓度仍有增加但培养液的摄氧率下降。最后因基质耗尽，细胞自溶，摄氧率便迅速下降。 碳源种类对细胞比耗氧速率的影响 一般微生物细胞利用葡萄糖的速度比其它糖快，因而在含葡萄糖的培养基中表现出较高的比耗氧速率。在分批培养过程中，随着碳源的消耗，成为限制性基质，细胞的呼吸强度下降。补入碳源后，培养液的摄氧率往往有明显增加。 此外，培养条件（如pH，温度等）对细胞的需氧要求也有影响；一些有害代谢产物的积累，也会抑制细胞的呼吸强度。 氧的满足度 通常溶解氧浓度对细胞生长和产物生成的影响可能是不同的，即对于细胞生长的最佳溶氧浓度不一定是生成产物的最佳氧浓度。溶解氧浓度与临界氧浓度之比称为氧的满足度。 氧的满足度 对于谷氨酸和天门冬氨酸类氨基酸的生产，当溶解氧浓度低于临界氧浓度时，氨基酸的产量下降，但对于苯丙氨酸，缬氨酸和亮氨酸的生产，则在低于临界氧浓度时获得最大生产能力，它们的最佳氧浓度分别为临界氧浓度的0.55、0.60、0.85倍。 问题？：请你利用生物化学的知识解释上述现象的原理？ 4.2 培养过程中氧的传递 氧从空气泡传递到细胞的过程中需要克服的阻力： 1）从气相主体到气液界面的气膜传递阻力 1／Ka 2）气液界面的传递阻力 1／Ki 3）从气液界面通过液膜的传递阻力 1／KL 4）液相主体的传递阻力 1／KLB 5）细胞或细胞团表面的传递阻力1／KLC 6）固液界面的传递阻力1／KIS 7）细胞团内的传递阻力1／KA 8）细胞壁的阻力1／KW 9）反应阻力1／KR 在以上的这些阻力中：1）－4）项是供氧方面的氧传递阻力；5）－9）项是耗氧方面的阻力，而氧从空气泡到细胞的总传递阻力为上述各项传递阻力的总和。 这种传递阻力有主次之分。当细胞以游离状态存在于液体中时，阻力7）细胞团内的传递阻力消失，而当细胞吸附在气液界面上时，阻力4）5）6）7）消失。 培养过程中氧的传质理论基础 氧在克服上述阻力进行传递的过程中需要推动力，传递中的总推动力就是气相与细胞内的氧分压之差，这一总推动力消耗于从气相到细胞内的各项串联的传递阻力。当氧的传递达到稳态时，总的传递速率与串联的各步传递速率相等。这时通过单位面积的传递速率为： 4.2.1 气－液相间的氧传递 氧从气相传递到液相是气液相间氧的传递过程，在此传递过程中气液界面的阻力1／KI可以忽略。1／KLB很小也可以忽略，此时主要的传递阻力存在于气膜和液膜中。 双膜理论的基本假设 假定在气泡和包围着气泡的液体之间存在着界面，在界面的气泡一侧存在着一层气膜，在界面的液体一侧存在着一层液膜。 气膜中的气体分子与液膜中的液体分子都处于层流状态，分子之间无对流运动，因此氧的分子只能以扩散方式，即借助于浓度差而透过双膜。 气泡内除气膜以外的气体分子处于对流状态，称为气流主体，在空气主流空间的任一点氧分子的浓度相同，液体主流中亦如此。 根据双膜理论，氧分子是借助于扩散作用透过气膜，穿过界面进入液膜并形成溶液，然后再以扩散方式透过液膜到达液相主体，当气－液传递过程处于稳态时，通过液膜和气膜的氧传递速率相等即: 根据亨利定律： 对于难溶气体（如氧），气膜传递阻力与液膜传递阻力相比可以忽略不计，即1／HkG1/kL，因此kL=KL在单位体积培养液中，氧的传递速率为： OTR－单位体积培养液中的氧传递速率mol/m3·s； －比表面积，m2/m3; 通常将KL与 合并在一起KLa作为一个参数处理，称为体积传递系数或容量传递系数（s-