色谱分析法重要导论.ppt

一、色谱分析概论 问题 问题1：什么是色谱法？ 问题2：为什么色谱法能将混合物分开？ 问题3：色谱法的分类？ 问题4：各种色谱法的应用范围？ 1、什么是色谱法？ 茨维特的实验 茨维特： 俄国植物学家，主要从事植物色素的研究工作，在1906 年发表的文章中，首次提出了色谱的概念。 茨维特的实验 因此 色谱法是一种分离方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，两相作相向运动。 Chromatography 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 色谱分析是一种分离、分析法。 2、色谱法分离原理 当流动相中所携带的混合物流过固定相时，就会和固定相发生作用(力的作用)。由于混合物中各组分在性质和结构上有差异，与固定相发生作用的大小也有差异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 3、色谱法的分类 按流动相状态的不同，可分为 什么是气相色谱法？ 以气体为流动相的色谱法 Gas Chromatogaphy，简称GC 按固定相状态的不同可分为： 气固色谱(GSC) 气液色谱(GLC) 适合分离分析易汽化（在- 190℃-500℃范围内有0.2-10mmHg的蒸气压的）稳定、不易分解、不易反应的样品，特别适合用于同系物、同分异构体的分离。 什么是液相色谱法？ 以液体为流动相的色谱法 Liquid Chromatogaphy，简称LC 适合分离分析高沸点、热不稳定、离子型的样品。 按固定相使用的形式可分为 柱色谱（Column Chromatography） 将固定相装在色谱柱内 纸色谱（Paper Chromatography） 用滤纸做固定相或固定相载体的色谱 薄层色谱（Thin Lay Chromatography） 固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上 关于分配平衡 分配系数K (distribution coefficient ) 分配比k又称为容量因子、容量比、分配容量，是指在一定温度和压力下，平衡状态时组分在固定相中的量与在流动相中的量之比值。是衡量柱子对组分保留能力的重要参数。 相比β 色谱柱内固定相和流动相体积之比 是柱型及结构的重要特征。 4. 色谱相关术语 关于色谱峰 关于保留值 关于分配平衡 关于色谱峰的术语  色谱峰宽（区域宽度） 峰底宽 Wb 在色谱峰两边的转折点所画的切线 与基线相交的截距。 标准偏差σ 拐点间距离的一半 0.607h 半峰宽度 峰高一半处的峰宽度 W 1/2 = 2.354 σ 峰底宽 Wb = 4σ 拐点处峰宽 Wσ = 2σ  （4）色谱图的信息 a. 色谱峰个数 判断试样中所含组分的最少数 b. 色谱保留值 定性 c. 色谱峰面积或峰高 定量 A = K C d. 保留值与区域宽度 评价柱分离效能依据 e. 两峰间距 评价两组分能否分离 关于保留值的术语 死时间(tM): 无保留组分出峰时间 保留时间(tR):从进样开始到色谱峰最大值出现所需时间 调整保留时间(t’R): 死体积(VM): 保留体积(VR): 调整保留体积(V’R): 相对保留值ɑ： 二、色谱分析法基本理论 研究理论的目的 解决色谱峰的分离问题 三个色谱基本理论问题 色谱热力学问题——发展高选择性色谱柱 色谱动力学问题——发展高效能色谱柱 分离条件的最优化问题——分离条件优化 1、色谱动力学理论 研究流出曲线展宽的本质及曲线形状变化的影响因素 塔板理论 速率理论 （1）塔板理论 推导 塔板理论将色谱柱比作精馏塔，通过概率理论得到流出曲线方程： 对色谱流出曲线方程的讨论 当t=tR时，C=Cmax，峰高正比于进样量C0，是峰高定量的理论基础。 当n越大，柱效越大，Cmax/ C0越大。即保留时间一定时，塔板数越多，峰越高。 Cmax反比于tR，tR小，Cmax大， 保留时间小的组分峰高且窄。tR大，Cmax小， 保留时间大的组分峰低且宽。 柱效 由流出曲线方程导出： H=L/n n是峰相对展宽的量度 n是柱效的量度 n是常数时，W与tR 成正比 n越大，H越小，表明组分在柱中达到的分配平衡次数越多，对分离越有利，但还不能预言各组分有被分离的可能性。 塔板理论的贡献 塔板理论有助于我们形象的理解色谱的分离过程。 导出色谱流出曲