矫天昊基因工程的操作步骤学案.docxVIP

星教育址劇O 辅导讲义 矫天昊 [k课日期 2016.12.11 课 程 类 别 \JZ x)x \—/ z(x z(x z(x 础高优 基提培 授课教师 余为国 年级 升高二 上课吋间 10:00-12:00 科组长签字 科冃 生物 第几学时 25-26 教学主任签字 、教学目的 简述基因工程基木操作程序的四个步骤 尝试设计某一转基因牛物的研制过程 二、上课内容 【探究一】目的基因的获取： 目的基因：符合人们需要的基因，主要指编码蛋白质的 ，也可以是一 些 O 获取目的基因的方法 从基因文库中获取目的基因 看教材9页，弄清楚基因文库、基因组文库、部分基因文库的丽、I包含关系I及瓯。 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ,导人受体菌的群体屮 ，各个受体菌分别含有这种牛物的不同基因，称为基因文库。 种类： 文库：含有—?种牛:物的 基因。 文库：含有一种生物的 基因，如 o 从基因文库中获取目的基因的方法 根据基因的有关信息：基因的 序列、基因的 ,基因在 上的位置、 基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。 利用PCR技术扩增目的基因。 PCR含义：是一项在 复制 的核酸合成技术。 前提条件：有一段已知目的基因的 序列，以便根据这一序列合 成 O ③过程: 看P10图卜 —— 第一步： 加热至90? 95 °C,目的是 第二步： 冷却到55? 60 °C,目的是 第三步： 加热至70? 75 °C,目的是 扩增方式：指数扩增===2n(n为扩増循环的次数) (3)人工合成法：如果基因长度 ,核昔酸序列 (已知、未知)，可以人工合成。 【探究二】基因表达载体的构建 1 .构建基因表达载体的目的(或表达载体的功能)：使目的基因在受体细胞 星y（教育瀝愚O* 中 ,并且可以 给下一代，同吋使目的基因可 TOC \o 1-5 \h \z 以 O 表达载体的纟H.成： + + + o 要求透彻理解：启动子、终止子、标记基因。 启动子:位于基因的 ，它是 识别和结合的部位，驱动基因转录产生 o 终止子：位于基因的 ,终止 O 标记基因：鉴别 ,从而将含冇II的基因的细胞筛选出来。 【探究三】将目的基因导入受体细胞 （一） 转化：目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和 的过程。 （二） 方法 将目的基因导入植物细胞 （1） 农杆菌转化法 农杆菌特点：易感染 植物和裸子杭物，对 植物没有感染力; Ti质粒的 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 转化：目的基因插入 d—农杆菌T导入植物细胞目的基因整合到植 物细胞染色体上T目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 （2） 基因枪法 基因枪法：是单了叶植物中常用的一种棊因转化方法，但是成木较高。 （3） 花粉管通道法 花粉管通道法：这是我国科淫家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我们 的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的） 将F1的基因导入动物细胞 （1） 方法： 注射技术。 （2） 操作程序：目的基因表达载体 T取卵（受精卵）T显微注射T注射了目的 基因的受精卵移植到—性动物的 内发育-新性状 动物。 将1=1的基因导入微生物细胞 （1） 原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。 （2） 转化： 处理细胞T 细胞T表达载体与感受态细胞混合T 细胞吸收DNA分了。 三、家庭作业 下列有关基因工程技术的正确叙述是（ ） 重组DNA技术所用的工具酶是限制酚、连接酚和载体 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核百酸序列 C?选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D.只要冃的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 构建基因组DNA文库时，首先得分离细胞的（ ） A、染色体 DNA B、线粒体 DNA C、总 mRNA D、tRNA 在基因工程屮，把选出的目的基因（共1000个脱氧核昔酸对，其屮腺嚟岭脱氧核莒酸 是460个）放入DNA扩增仪屮扩增4代，那么，在扩增仪屮应放入胞唸噪脱氧核莒酸 的个数是（） 540 个 B.8100 个 C. 17280 个 D.7560 个 星*教育盘憋O* 聚合酚链反应可表示为（ ） A、PEC B、PER C、PDR D、PCR 在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是（ ） A、化学合成法 B、基因纟fl文库法 C、cDNA文库法 D、聚合酶链反应 钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方而的杰岀成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物屮 检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。 由此可知（） 该生物的基因型是纯合的 绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达 该生物与水母有很近的亲缘关系 改变绿色荧光蛋白基因的1个碱基对，就不能检测到绿色荧光 对