第三章红细胞检验.ppt

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第三章 红细胞检验 第一节 红细胞生理 第二节 红细胞计数 第三节 血红蛋白测定 第四节 红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义 第五节 网织红细胞概述 第三章 红细胞检验 第六节 红细胞比容测定 第七节 红细胞直径测定 第八节 计算红细胞平均数 第九节 红细胞形态检验 第十节 点彩红细胞检验 学习目标 1.概述红细胞的生成、形态与功能以及血红蛋白的结构和吸收光谱。 2.叙述红细胞显微镜计数原理、试剂、操作、计算、注意事项。 3.比较红细胞计数和白细胞计数的异同。 4.概述红细胞计数的计数误差及质量控制。 第一节 红细胞生理 一、红细胞的发育过程 二、红细胞形态与功能 三、血红蛋白结构与吸收光谱 一、红细胞的发育过程 成熟红细胞    120天     二、红细胞的形态与功能 形态:双凹圆盘状; 直径:6~9μm,平均7.2μm; 厚度:边缘部分约2μm,中央约1μm 侧面观呈哑铃形。 在高渗溶液中: 红细胞皱缩,边缘呈锯齿状; 在低渗溶液中: 红细胞肿涨甚至破裂,血红蛋白逸出后形成影细胞。 血涂片经瑞特染色后,细胞呈粉红色,中央着色较淡,有明显的中央淡染区,淡染区的直径约占红细胞直径的1/3~2/5。 红细胞主要成分 血红蛋白和水(64%~70%),其余成分为蛋白质、磷脂、无机盐和酶。 功能: 1.运输O2和CO2 2.调节酸碱平衡 3.免疫粘附 三、血红蛋白结构与吸收光谱 Hb的结构: Hb的分子量:64458。 1分子Hb:4个亚铁血红素,4个Fe, 可结合4个O2。 1molHb:4mol Fe,可结合4mol O2。 1克Hb:含3.47mg Fe , 结合1.39ml O2。 在正常情况下,外周血中的血红蛋白主要有: 氧合血红蛋白(HbO2) 还原血红蛋白(Hbred) 碳氧血红蛋白(HbCO) 高铁血红蛋白(Hi或MHb)。 吸收光谱特征: 氧合血红蛋白(HbO2):呈鲜红色,在578nm(黄色光)和540nm(绿色光)处有两条吸收光带。 还原血红蛋白(Hbred):呈暗红色,在556nm(黄、绿色光之间)处有一条吸收光带。 碳氧血红蛋白(HbCO):呈樱红色,在572nm(黄色光)和535nm(绿色光)处有两条吸收光带。 高铁血红蛋白(Hi):呈红褐色,在634nm、578nm、540nm和500nm处有4条吸收光带。 第二节 红细胞计数 原理 第二节 红细胞计数 器材 稀释液 甲醛枸橼酸盐稀释液 Hayem稀释液 稀释液 1.甲醛枸橼酸盐稀释液 成分 功能 枸橼酸钠 抗凝、维持渗透压 36%甲醛液 防腐并固定红细胞 氯化钠 维持渗透压 蒸馏水 稀释液 2.Hayem稀释液 成分 功能 氯化钠 调节渗透压 硫酸钠 提高相对密度,防止细胞粘连 氯化高汞 防腐剂 蒸馏水 操作 加稀释液:2.0ml ↓ 采血:10μl ↓ 混匀 ↓ 充液 ↓ 静置:2~3min 操作 ↓ 计数:高倍镜下中央大方格 五个中方格的RBC ↓ 计算: RBC/L =五个中方格的 RBC  ×5×10×200×106 ↓ 报告:RBC:△. △△×1012/L 请您练习 取稀释液1.99ml,加血10μl,计数中央大格内五个中方格红细胞为500个,请报告结果? 答案: RBC=500×5×10×200×106 =5.00×1012/L 请您练习 取稀释液2.0ml,加血20μl,计数中央大格内10个中方格红细胞为800个,请报告结果? 答案: RBC=800/10×25×10×(2000+20)/20×106 =2.02×1012/L 压线红细胞的计数方法: 注意事项 1. 血量要准确。 2. 稀释液要过滤。 3. 红细胞计数池内要分布均匀。 注意事项 4. 实验器材应清洁干燥。 5. 自身凝集素增高者,宜用不含甲醛的枸橼酸盐稀释 液。 6.同时做白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白测定,应先取红细胞计数用血。 7. 如实记录实验结果,每次签发报告前应仔细核对。 计数误差 1.技术误差 同白细胞计数 白细胞数过高时应进行校正。 2.固有误差 严重贫血的标本,应缩小稀释倍数或扩大计数 范围 。 质量控制 1.两差比值评价法 DR= ————— 质量控制 2.变

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