pH值对植酸酶酶活的影响及其在猪_鸡消化道中的分析.docVIP

　　表1　不同pH 值条件下两种植酸酶酶活的测定值(以pH 值为515时的测定值为标准酶活 pH 值210215310315410415510515610615N 相对酶活(%201074615349161461615713368165931141006414511111T 相对酶活(% 37156 40164 77182 47144 63185 86167 95113 100 57195 16128 pH 值对植酸酶酶活的影响 及其在猪、鸡消化道中的分析 史凯来　王秀坤　刘伟　陆文清　顾云强辽宁省饲料研究所 摘要　通过测定在不同pH 值条件下两种植酸酶的活性,发现pH 值对植酸酶活力有较大影响。在鸡嗉囊的pH 值条件下,T 植酸酶和N 植酸酶的酶活相对标准酶活都是100%,而在动物真胃的pH 值条件下,T 植酸酶和N 植酸酶的酶活相对标准酶活分别是77182%和49161%。关键词　植酸酶酶活　pH 值　酶活 前　言 植酸酶是一类能分解植酸(肌醇六磷酸酯释放 无机磷的生物酶。目前在饲料工业中应用的饲用植酸酶是一种复合酶,含有多种组分的酶蛋白,有时还包括酸性磷酸酶。因为要想彻底分解植酸成为肌醇和磷酸是离不开酸性磷酸酶的。 有许多的研究结果表明,目前实际应用的植酸酶绝大多数是由曲霉和酵母产生的。由曲霉产生的植酸酶主要包括两种组分。一种组分其最适pH 值在215左右,主要在胃中起分解植酸的作用,简称为PhytA 。另一种组分的最适pH 值在515左右,简称为PhytB ,这种组分在动物的肠道内起分解植酸的作用。酸性磷酸酶也包括两种组分。一种组分最适pH 值在215左右,简称为Pa ,第二种组分的最适pH 值在515左右,简称为Pb 。两者分别在动物的胃和小肠(嗉囊、肌胃起分解植酸的作用。由于不同的微生物所产生的植酸酶系不一样,有的只含有Phy 2tA ,有的只含有PhytB ,有的含有PhytA 和Pa ,有的四种都含有,而不同酶蛋白的最适pH 值也不同,造成了不同微生物所产生的植酸酶的最适pH 值差异很大。为了使饲料生产企业和养殖户能正确使用植酸酶,充分发挥其作用,笔者对测定酶活用缓冲液的pH 值与植酸酶活力之间的关系进行了分析。 1　材料与方法1.1　材料 T 植酸酶(挑战植酸酶　N 植酸酶(乐多仙植 酸酶 1.2　仪器设备 酸度计(上海伟业仪器厂 恒温水浴锅(陕西省文水医疗器械厂磁力搅拌器(深圳天南海北有限公司 分光光度计(756型(上海第三分析仪器厂1.3　实验设计 实验分为两组,第一组T 植酸酶用pH 值分别为210、215、310、315、410、415、510、515、610、615的缓冲液进行样品的前处理,测定时底物植酸钠溶液的pH 值与样品处理液的pH 值相对应。第二组也用pH 值分别为210、215、310、315、410、415、510、515、610、615的缓冲液对N 植酸酶样品进行前处理,测 定时底物植酸钠溶液的pH 值与样品前处理液的pH 值相对应。测定酶活时设两个平行,取平均值。1.4　酶活测定方法:FeS O 4—磷钼酸铵法[3]。2　实验结果与讨论从表1可以看出缓冲液的pH 值对植酸酶的酶活影响很大,而且对于不同的植酸酶产品的酶活影响也不相同。从图1可以看出在动物的消化道的不同部位的pH 值条件下,植酸酶的酶活差异很大,在 8 饲料研究　　　　　　　　　　　　2000年第7期 图1　动物体消化道内pH值条件下两种植酸酶酶活 柱1表示在动物的胃中pH值条件下N植酸酶的相对酶活 柱2表示在鸡的嗉囊pH值条件下N植酸酶的相对酶活 柱3表示在动物的胃中pH值条件下T植酸酶的相对酶活 柱4表示在鸡的嗉囊pH值条件下T植酸酶的相对酶活 真胃的pH值条件下的T植酸酶酶活只有标准酶活的77182%,N植酸酶只有标准酶活的49161%,在鸡嗉囊的pH值条件下,T植酸酶和N植酸酶的酶活都是标准酶活的100%。 植酸酶主要应用于单胃动物,常见的单胃动物有猪和鸡。对于猪来说植酸酶对植酸水解作用主要发生在胃中,在肠道中植酸酶会被蛋白酶分解,几乎全部丧失活性。对于鸡来说植酸水解主要发生在嗉囊、肌胃和腺胃中。在猪胃中食糜的pH值在2~4之间,在鸡嗉囊和肌胃的pH值是5~6之间。所以测出的标准酶活对于鸡的饲喂有一定的指导意义,而对于猪来说意义不大。目前有些文献表明:每kg 饲料中植酸酶的添加量应在350~1200FY T之间。而有些报道认为:在猪的饲养过程中,植酸酶添加量在350~500FY T之间,再高就无意义,推想可能是由于实验中所使用的植酸酶产品不同。 3　结论 从实验的结果可以看出,pH值对植酸酶的活力影响很大,而且对不同来源的植酸酶酶活的影响也不相同。现在测定植酸酶酶活的方法多是在pH值为515的条件下进行的,虽