选修3 基因工程.pptVIP

【纠错笔记】　(1)基因诊断 基因诊断是用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。 (2)基因治疗 把健康动物的正常基因导入含有缺陷基因的受体细胞中,存在基因缺陷的病人细胞中既含有缺陷基因，又含有通过基因工程导入的正常基因，在病人体内两种基因都能表达,正常基因的表达产物掩盖了缺陷基因的表达产物，从而治愈了基因缺陷引起的疾病。 考题链接 基因工程的操作过程 (2012·高考新课标全国卷)根据基因工程的有关知识，回答下列问题： (1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有__________和__________。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下： AATTC……G 　 G……CTTAA 例3 为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是____________________________。 (3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即__________DNA连接酶和________DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是____________，产物是____________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用____________技术。 (5)基因工程中除质粒外，__________和__________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 ___________________________________________。 【解析】　(1)当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。 (2)为使运载体与目的基因相连，不同的限制酶应切割出相同的黏性末端，它们必须要能识别相同的核苷酸序列，并且使每条链中相同的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)DNA连接酶,根据酶的来源不同,可以将这些酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E·coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4 DNA连接酶。 (4)反转录是以RNA为模板来合成DNA的过程。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(多聚酶链式反应)。 (5)基因工程中载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (6)大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜，能阻止其他物质的进入，只能通过Ca2＋处理细胞，使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。 【答案】　(1)黏性末端　平末端　(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同　(3)大肠杆菌　T4　(4)mRNA(或RNA)　cDNA(或DNA)　PCR　(5)噬菌体　动植物病毒　(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 知能演练?强化闯关 本部分内容讲解结束 按ESC键退出全屏播放 目录 选修3　现代生物科技专题 第33讲　基因工程 本讲目录 回归教材?夯实基础 知能演练?强化闯关 高频考点?深度剖析 易错辨析?技法提升 回归教材?夯实基础 一、基因工程的核心及操作工具 1．基因工程的核心是___________________。 2．基因工程的操作工具有___________________、DNA连 接酶和载体。 (1)限制性核酸内切酶能够识别特定的_____________,并在特定的位点上进行切割。 (2)DNA连接酶可以将__________和载体DNA连接在一起。 (3)质粒是能够__________的双链环状DNA分子，最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，含有抗生素抗性基因，是重组基因导入受体细胞的标志。 构建重组DNA分子 限制性核酸内切酶 核苷酸序列 外源基因 自主复制 想一想 1．处理目的基因和载体的限制酶一般是同一种，你知道是什么原因吗？ 【提示】 因为用同一种限制酶处理目的基因和载体可以得到相同的粘性末端，用DNA连接酶才可以将它们连接在一起。 二、基因工程的操作步骤 步骤一：获得目的基因 获取目的基因的办法有化学方法合成和从___________中提取 步骤二：形成重组DNA分子 通常用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA，然后用_____________将目的基因和载体DNA连接在一起 步骤三：将_____________导入受体细胞 常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等 基因文库 DNA连接酶 重组DNA分子 步骤四：筛选含有目