基因工程甜蛋白.docVIP

基因工程甜蛋白人工设计并合成了monellin甜蛋白基因，并在大肠杆菌中表达，经测定其甜度是相同重量蔗糖的1100倍，且甜味纯正。经诱导表达，分离纯化得到的[Asn66]monellin甜蛋白，其甜度是相同重量蔗糖的4500倍。为提高甜蛋白的表达效率，研究了培养基、菌龄等8种因素对甜蛋白表达的影响，确定了发酵条件的优化方案，使甜蛋白的产量由原来的70μg/ml提高到了240μg/ml，表达效率占菌体可溶性蛋白由25%提高到40%。该项目2000年通过了专家鉴定，为甜蛋白monellin的规模开发和应用提供了优良的基因工程菌株和发酵工艺数据。其关键技术“编码甜蛋白的合成DNA序列及生产该蛋白质的方法”和“编码高甜度莫奈灵的基因及其产物蛋白的利用”于2001年1月获国家发明专利2项（专利号分别为Z7和Z3）。有关技术已转让给山西省大同市同风肉制品厂，甜蛋白进入中试。 转基因抗青枯病马铃薯设计合成了新抗菌肽基因，构建了一批单价及双价抗菌肽基因的植物表达载体，并导入马铃薯，获得218个转基因马铃薯株系，其中185个株系中有抗菌肽基因的表达。在温室及田间人工病圃对转基因马铃薯进行青枯病抗性鉴定，获得中抗水平的株系8个，抗性比起始品种提高1～2级。在四川省对34个转基因马铃薯株系进行农艺性状筛选，有些株系已接近起始品种米拉。完成了转基因马铃薯田间