当A﹤0.05时,方括号中其它各项与第一项相比可忽略不计,上式简化 If = 2.3 ?f I0A =2.3 ?f I0 ?cL 当A﹤0.05时, If与 ?f 、I0、 ?和c 有关,对一给定物质,当激发光波长和强度一定时, ?f 、I0、 ?和L为常数,合并为K If = Kc Ip = Kc 定量分析依据 荧光强度与物质浓度呈线性关系,If=Kc只有在浓度低时使用,荧光物质测定的是微量或痕量组分,灵敏度高。 浓度高时, If与c不呈线性关系,有时c增大, If反而降低。因为公式[ ]中后面影响,有时发生荧光猝灭效应。 If=Kc 浓度效应包括: 1. 内滤效应 2.发光分子形成基态或激发态的聚合物 3.发光的再吸收 光源 样品池 激发 单色器 检测器 数据处理 仪器控制 发射 单色器 8.2.2 荧光、磷光分析仪器 8.2.2.1荧光分析仪器 测量荧光的仪器主要由四个部分组成:激发光源、样品池、双单色器系统、检测器。 特殊点:有两个单色器,光源与检测器通常成直角。 光源 氙灯 激发单色器 样品池 光电倍增管 数据处理 仪器控制 发射单色器 荧光光度计仪器光路图 1. 光源: 氙灯和高压汞灯,染料激光器(可见-紫外区) 光源要求: 发射强度足够且稳定的
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