第五章 发酵过程控制.pptVIP

第一节、发酵过程的主要控制参数 （二）化学参数 （发酵液的菌体量和单位时间的菌浓、溶氧浓度、糖浓度、氮浓度和产物浓度等的变化值） 计算 （菌体的比生长速率、氧比消耗速率、糖比消耗速率、氮比消耗速率和产物比生产速率） （控制产生菌的代谢、决定补料和供氧工艺条件） 研究 发酵动力学 1．菌体生长阶段 碳源、氮源进行分解代谢：碳源、氮源和磷酸盐等营养物质不断被消耗，浓度明显减少。 菌体进行合成代谢：菌浓明显增加、摄氧率不断增大，溶氧浓度不断下降。至菌丝浓度最大，溶氧浓度最小。 2．产物合成阶段 （产物分泌期或发酵中期） 这个阶段主要是合成抗生素。 以碳源和氮源的分解代谢和产物的合成代谢为主，菌体的生长达恒定（DNA含量恒定），进入合成阶段的稳定期。 该阶段是发酵调控的主要阶段，外界环境的变化很容易影响这个阶段的代谢，破源、氮源和磷酸盐等营养物质的浓度必须控制在一定的范围内，使该阶段的持续时间尽量延长。如该阶段营养过剩，则菌体进行生长繁殖，抑制产物的合成，如营养过少，菌体会过早衰老死亡。 3．菌体自溶阶段（菌体自溶期或发酵后期） 菌体衰老，细胞开始自溶，氨氮含量增加，pH上升，产物合成能力衰退，生产速率下降。 发酵到此期必须结束。 例 pH对林可霉素发酵的影响 林可霉素发酵开始，葡萄糖转化为有机酸类中间产物，发酵液pH下降，待有机酸被生产菌利用，pH上升。若不及时补糖、酸，发酵液pH可迅速升到8.0以上，阻碍或抑制某些酶系，使林可霉素增长缓慢，甚至停止。 （2）发酵pH的控制： ①调整基础培养基：适当调整C/N比，或加入产酸或产碱物料—作用有限 ②补料控制：可直接补加酸、碱性物质 一般加生理性酸碱 pH低：补尿素、氨水 pH高：硫酸氨 加生理性酸碱，即可调节pH,同时补充营养。 三、溶氧的影响和控制 1. 定义： 溶氧（DO）指溶解在发酵液中的氧。单位ppm (毫克·分子/升） 2.DO对发酵的影响 DO不足：微生物代谢异常，产量下降，菌体过早衰老死亡； DO太多：发酵液泡沫过多，抑制产物生产，同时空气消耗增加。 3. 溶氧（DO）的判断 一般发酵液的DO范围在20-25ppm,在菌体生长阶段及产物合成阶段氧的需求最大，DO表现最低。而菌体进入衰老自溶阶段后，DO的浓度会逐步升高。 4.DO的测定：溶氧电极传感器（氧化还原反应） 5.DO的控制：搅拌转速-搅拌器 通气速率 四、 泡沫的影响与控制 一、泡沫的性质及对发酵的影响 1.产生原因： 2.泡沫的性质： 发酵液液面上的泡沫，气相所占的比例特别大，与液体有较明显的界限，如发酵前期的泡沫； 发酵液中的泡沫，又称流态泡沫，分散在发酵液中，比较稳定，与液体之间无明显的界限。 使发酵罐的装填系数减少； 造成大量逃液，导致产物的损失，增加了染菌的机会； 氧传递减弱； 使微生物菌体提早自溶，降低发酵物产量。 3.对发酵的影响： 4.泡沫的控制 泡沫的控制，可以采用三种途径： （1） 调整培养基中的成分(如少加或缓加易起泡的原材料)或改变某些物理化学参数(如pH值、温度、通气和搅拌)或者改变发酵工艺(如采用分次投料)来控制，以减少泡沫形成的机会。但这些方法的效果有一定的限度。 （2）机械消沫 靠机械引起的强烈振动或压力的变化促使气泡破裂。 罐内消沫法：在搅拌轴上方装消沫桨，通过消沫 桨转动打碎泡沫。 罐外消沫法：将泡沫引出罐外，通过喷嘴的加速 作用或利用离心力来消除泡沫。 优点：不需加入外界物料，可节省原料，减少污染 杂菌的机会。 缺点：消沫效果不理想，仅可作为辅助的消沫方 法。 （3）消沫剂消沫（化学消沫）--最常用，有效 化学消泡剂的要求（或化学消泡剂的特点） 化学消泡剂必须是表面活性剂，具有较低的表面张力，消泡作用迅速有效； 具有一定的亲水性，以使消泡剂对气—液界面的分散系数足够大，从而迅速发挥消泡活性； 在水中的溶解度必须较大，以保持持久的消泡或抑泡性能； 对人、畜及微生物细胞无毒性； 应不影响氧在培养液的溶解和传递； 必须来源方便、广泛，价格便