七章节微生物生长及其调控说课材料.pptVIP

第七章 微生物的生长及其调控 ;微生物生长？微生物繁殖？;1、数量测定 显微直接计数法（血球计数器法）、菌落计数法等 2、重量测定 称重法（干重法）;;细菌生长曲线各时期特点; 特点：分裂迟缓、代谢活跃。 延迟期出现的原因：主要是为了调整代谢。当细胞接种到新的环境（如从固体培养基接种到液体培养基）后，需要重新合成必需量的酶、辅酶或某些中间代谢产物，以适应新的环境。;对数期; 二、对数期 又称为指数期（exponential phase） 细胞数目以几何级数增加,故称对数期。; 在对数期细胞数按几何级数增加:1,2,4,8,… ,若以乘方的形式则表示为：20,21, …, 2n。 “n” 是细菌分裂的次数或增殖代数。;公式： G = ( t1 - t0 ) / n;例题：设大肠杆菌在接种时的细胞浓度为100个/mL, 经400分钟的培养，细胞浓度增至10亿个/mL,求该菌的世代时间和繁殖代数。;三、稳定期（stationary phase） 又称恒定期或最高生长期。处于稳定期的微生物，新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，整个培养物中二者处于动态平衡，此时的生长速度又逐渐趋向零。;特 点： ?1.培养物中细胞总数最高。如果为了获得大量菌体就应在此阶段收获。 ;四、衰亡期（decline phase） 细菌死亡率逐渐增加，以致死亡数大大超过新生数，群体中活细菌的数目急剧下降，出现“负生长”，此阶段叫衰亡期，又称死亡期。 ;特点： ??1.死亡期中有一段时间, 活菌数按几何级数下降, 称为“对数死亡阶段”。 ; 第二节 连续培养 ;连续培养（continuous cultivation）是指在一个恒定容积的流动系统中培养微生物，一方面以一定速率不断地加入新的培养基，另一方面又以相同的速率流出培养物（菌体和代谢产物），以使培养系统中的细胞数量和营养状态保持恒定，即处于稳态。 连续培养可分为：恒浊连续培养和恒化连续培养。; 恒浊连续培养 ? 不断调节培养基流入或排出的速率以使培养液中微生物细胞密度保持恒定（恒浊）。 在恒浊培养装置中需要浊度计。借光电池检测培养室中的浊度，并由光电效应产生的电信号强弱变化，来自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速。培养室中浓度超过预期值时，流速加快，浊度降低；反之，流速减慢，浊度增加，以此来维持培养物的某一恒定浊度。 ;恒浊连续培养; 恒化连续培养 ?? 随着细菌的生长，限制性因子的浓度降低，致使细菌生长速率受限，但同时通过自动控制系统来保持限制因子的恒定流速，不断予以补充，就能使细菌保持恒定的生长速率。 常见的限制性营养物质有作为氮源的氨、氨基酸；作为碳源的葡萄糖、乳酸及生长因子，无机盐等。 ;; 第三节 同步培养 ;同步培养法（synchronous cultivation）能使培养物中所有微生物都处于相同的生长阶段的培养方法。 ? 同步培养法通常分为选择法和诱导法。 ;硝酸纤维素薄膜法 ① 将菌液通过硝酸纤维素薄膜，由于细菌与滤膜带有不同的电荷，所以不同生长阶段的细菌均能附着于膜上。 ② 翻转薄膜，用新鲜培养液滤过培养。 ③ 附在膜上之细菌分裂，分裂后的子细胞不与薄膜直接接触，由于其本身的质量，加上所带的培养液的质量，便会落到收集器内。 ④ 收集器在短时间内收集的细菌处于同一分裂阶段。用此细菌接种培养，便可获得同步培养物。 离心沉降分离法 处于同一生长阶段的同步细胞，其体积和质量大致相等，处于不同生理阶段的细胞，体积和质量大小不等，子细胞与成熟细胞大小差别较大，通过离心沉降，易于分开。然后用相同大小的细胞进行培养便可获得同步培养物。 ; 诱导法 采用物理、化学因子使微生物细胞进行到某个生长阶段而停下来，然后再去除该因子，以达到诱导微生物细胞同步生长的目的。主要通过控制环境条件如温度、营养物质等来诱导同步生长。 ?;同步生长能否无限的维持下去？; 由于同步群体内细胞个体之间的差异，同步生长不