分子生物学介绍DNAStructureandChemistry.ppt

4.斑点杂交 Dot-bloding DNA、RNA直接点膜,进行杂交。 DNA:不同物种、不同个体间的比较; RNA:表达的强弱。 5. 原位菌落杂交 主要用于文库筛选,寻找目的基因。 基因文库 基因组文库 cDNA文库 cDNA——mRNA逆转录的产物 基因组文库构建 cDNA文库构建 原位菌落杂交 6.原位组织杂交 检测样本中组织、细胞特异性(基因在细胞、组织中真实的表达情况) 靶分子——组织、细胞中的RNA 探针——标记的DNA 可检测基因在不同时期、不同组织、不同部位的表达情况——基因表达的组织、细胞特异性。 组织学检测方法 (一)一般光学显微镜 镜下结构称光镜结构, 放大倍数1500倍, 分辨率0.2μm,观察时,须将组织制成薄片,以利光线通过。 ????? ????? 石蜡切片---最常用 制片过程:1、取材 2、固定 3、脱水 4、透明 5、浸蜡包埋 6、切片:5-7微米厚度 7、展片 8、脱蜡 9、染色 10、脱水 11、封片 还有冰冻切片(酶组织化学染色),涂片(血液),铺片(疏松结缔组织),磨片(牙和骨)等制作切片的方法。

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