基因工程教案第二章染色体和DNA.pptVIP

Holliday的异构化 产生重组体的拆分 Holliday结构一经生成即可 不断地处于异构化－－异源双链 heteroduplex DNA 重组结果取决于拆分时 配对链上的切口位置 “亲本链” “重组体” * * DNA的直接修复 直接修复是把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复。如在DNA光解酶的作用下修复嘧啶二聚体。 SOS反应 SOS反应是细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的经济状况下，细胞为求生存而产生的一种应急措施。 SOS反应包括诱导DNA损伤的修复、诱变效应、细胞分裂的抑制等。 SOS反应广泛存在于原核和真核生物中，可产生两方面的作用：DNA的修复、DNA的变异。 第五节 DNA的转座 DNA的转座，或称位移，是由可位移因子介导的遗传物质重排现象。转座子最先由Barbara McClintock于20世纪40年代在玉米遗传学研究时发现的。 * * 1. 转座子的分类和结构特征 转座子（transposon, Tn）是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。 转座子存在于所有生物体内，人类基因组中由35%的序列为转作序列，其中大部分与疾病有关。转座子分为两大类： 插入序列（insertional sequence, IS） 复合型转座子（composite transposon） * * 第五节 DNA的转座 插入序列（IS因子） 最简单的转座子，不含任何宿主基因。 特征： 很小的DNA片段 末端具有倒置重复序列 复制宿主靶位点DNA（4-15bp） 转座频率10-4-10-3/世代 恢复频率10-10-10-6/世代 * * 第五节 DNA的转座 * * 复合型转座子 复合型转座子是一类带有某些抗药性基因（或其它宿主基因）的转座子。 特征： 复合型转座子两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。 IS序列插到功能基因的两端就可能产生复合型转座子。 复合型转座子的转座能力由IS序列决定和调节的。 * * 复合型转座子 复合型转座子还有一类无IS序列、体积庞大的的转座子（5000bp以上）——TnA家族。 TnA特征： 携带3个基因，其中 一个为编码β-内酰胺 酶基因（AmpR） 两翼都有38bp的倒置 重复序列（IR） 2. 真核生物中的转座子 转座子也存在于真核生物中。在玉米和果蝇中发现了多个在基因组内随机分布而且能重复移动的转座因子序列。 玉米中的转座子 Ac-Ds系统 Spm-dSpm系统 果蝇中的转座子：P转座子（可诱发杂种不育） * * 第五节 DNA的转座 * * 3. 转座作用的机制 限制性内切酶切开靶序列 转座子插入，形成具有单链粘性末端的转座子 修补缺刻，形成直接重复序列。 * * 第五节 DNA的转座 3. 转座作用的机制 转作可分为复制型和非复制型两大类 复制型（TnA类） 非复制型（IS序列、Mu及Tn5） * * 复制型 非复制型 4. 转座的遗传效应 引起插入突变，可导致基因表达失活。 产生新的基因。 产生的染色体畸变，引起DNA缺失或倒位。 引起的生物进化，可产生新的生物学功能的基因。 * * 第五节 DNA的转座 第三节 DNA的复制 双链DNA的复制是一个非常复杂的过程，在复制的起始、延伸和终止三个阶段，需要多种酶和蛋白质的协同参与。 * * 第三节 DNA的复制 * * 1. DNA的半保留复制 Watson和Crick在提出DNA双螺旋结构模型时即推测，DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开，然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链，这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式为半保留复制。 第三节 DNA的复制 * * 1. DNA的半保留复制 1958年，Meselson和Stahl研究了经15N标记3个世代的大肠杆菌DNA，首次证明了DNA半保留复制。 第三节 DNA的复制 * * 2. 复制的起点、方向和速度 复制时，双链DNA要解开成两股链进行，使复制起点呈叉状，被称为复制叉。 复制子为生物体DNA的复制单位。 第三节 DNA的复制 * * 2. 复制的起点、方向和速度 复制时，复制叉从复制起点开始沿着DNA链连续移动，起始点可以启动单向复制或者双向复制。这取决于复制起点形成一个复制叉还是两个复制叉。如右图： 第三节 DNA的复制 * * 2. 复制的起点、方向和速度 DNA复制时，复制方向有5’向3’复制，前导链连续合成，后随链合成不连续，形成冈崎片段。如图： 第三节 DNA的复制 * * 2. 复制的起点、方向和速度 DNA复制： 复制起点是固定的，表现