人感染Ｈ７Ｎ９禽流感防控样本采集、检测与运送要求.ppt

* * * * * * * * * * 我讲的题目是xxx，主要是根据人感染H7N9禽流感病毒一些新的特征结合我们流感常年监测的经验给大家作一介绍。 * 首先，咱们来看一下采样的对象。第一个是人感染H7N9禽流感疑似病例，疑似病例在最新版的诊疗方案里有明确定义，这里不再详述。这个第二条，其实是诊疗方案（2013年第1版） 里对监测病例的定义，即… 第三个即密切接触者，指的是… * 然后咱们来看一下标本的采集，在疫情防控方案和诊疗方案中都有明确的要求。其中诊疗方案中提到，抗病毒治疗之前必须采集呼吸道标本送检，这里面列举了几种常见的标本类型，如鼻咽分泌物（也就是我们常说的鼻咽拭子，尤其是咽拭子标本在病毒标本的采集中最为常见）、口腔含漱液（一般情况下，如果能采到鼻咽拭子或其他标本，就不推荐采集口腔含漱液，因为其检出率不高。当然特殊情况下除外。）、呼吸道分泌物，特别是气管深部咳痰和气管吸取物。研究表明，相对于季节性流感病毒而言，H7N9更容易感染人的下呼吸道上皮细胞。因此，对于上了呼吸机的患者，特别推荐大家采集气管深部咳痰或气管吸取物。根据CDC的一些经验，我这里还加了一条，即肺深部吸取物或灌洗液作为尸检标本（贵州首例）。另外一个应当采集的是双份血清，即发病7天内急性期血清和间隔2-4周的恢复期血清。总的原则的是优先采集下呼吸道标本。为什么我们一再强调这个，我这里也举个例子：深圳首例确诊病例最初咽拭子检测两次被检为阴性，后来才从下呼吸道标本中检出。根据钟南山的介绍，他们另有一个病例，发病后第八天，咽部只有三十几个病毒拷贝，而下呼吸道已经达到十万份的病毒拷贝数。所以临武那天送来的第一个排查病例，我一看是咽拭子标本，赶紧让他们加采了下呼吸道标本，还好检测结果都是阴性的。 * 采样工具的话。病毒采样液，主要有MEM或DMEM液，Hanks液及商品化的采样管套装，采集的量的话不能低于4ml。经常有县里的同行问没有采样液直接用生理盐水行不行？我们知道病毒的两种主要成分，核酸和衣壳蛋白。病毒颗粒采集进入采样液后，就开始进入自行分解过程，病毒采样液应该提供一个利于病毒结构稳定的环境，保护病毒衣壳蛋白不被破坏，才能保证后续的核酸提取式样能够分解到病毒核酸物质。而生理盐水是满足不了这一要求。除非特殊情况下，那也要在最快的时间内将样本送到我们实验室来，时间不能太久。另外采样用的拭子我们用的是聚丙乙烯纤维头塑料杆拭子，这种拭子的采集和释放效果都较好，塑料杆较长，方便插入咽部采集，采集完后易于折断方便使用。普通棉签的话必须灭菌后方可使用。我们做病毒分离培养的基础培养基是DMEM，所以我们首先推荐用MEM和DMEM液，这两种培养基都有干粉装和液态瓶装，很容易买到。 * 标本的采集方法，这里主要首先介绍一下咽拭子的采集… 这里咱们可以看一下视频。 另外，这里提一句我们手足口病肛拭子的采集方法，稍微有点不同的是，采样前先将拭子用采样液沾湿后再插入肛门缓慢旋转后抽出即可。 * 关于鼻咽抽取物或呼吸道抽取物的采集，我相信医院里的朋友比我还熟悉一些，我这里就照本宣科稍微念一下。 * 禽流感外环境标本一般主要采集的是环境污水，禽类粪便和笼具涂抹拭子。关于环境污水我这里提一句，往常区里面送环境污水的时候都是清亮的，我想是不是采样的时候没有充分搅匀，而是直接采的上清液。禽类粪便的话尽量采新鲜的标本，3-5g即可，不多也不少。笼具涂抹拭子稍微麻烦一点，一套笼具要求采集3-5个部位。 这里特别强调一下，1月29日，湖南省疾控中心下发了《关于做好人感染H7N9禽流感防控工作的紧急通知》，通知要求全省各级疾控中心开展环境应急监测，各县市区疾控中心每月2次采集活禽批发市场（批发点）、中心农贸市场的环境标本，每地点不少于3份标本/次，采集的标本以禽类饮水和市场污水为重点。有条件的县市区自己开展检测，无条件的则委托市州疾控中心进行检测。应急监测从2月份开始，根据疫情发展形势确定终止时间。 由于很多县级疾控中心都是第一次开展环境标本的采集工作，这里特别提一下注意事项… 然后我们来看一下标本运输的一些要求。H7N9是作为高致病性禽流感病毒进行管理，采集、包装、运输都有严格的要求。特别是对于病例的临床标本，必须要按照B类感染性物质进行包装运输，在低温条件下，24小时内送到我们实验室检测。 感染性物质的包装运输分为A，B两种规格。两种都有3层防护，即主容器、辅助容器和外包装。这张图显示的是B类感染性物质的包装示意图。容器是可以重复使用的，这里要求没有配备的县区疾控赶紧采购，以备不时之需。下面图示一下AB两类包装的区别。 * 主容器是一样的。有常见的病毒采样管，真空采血管，血清管，粪便采样瓶等。 辅助容器，A类要求防水，防穿刺，防泄漏。B类要求防水，防破损，防泄漏。右上角的A类包装用的就是防穿刺