第五章分子生物学研究方法-公开课件(精).pptVIP

2. pBR系列 来源于Psc101、colE1和RSF2124三个天然质粒改造重组而成， pBR322是应用最多的大肠杆菌质粒载体，用氯霉素扩增法可使质粒DNA占细胞DNA总量的50%，这对制备大量质粒DNA极为有利。 3. pUC系列 pUC系列质粒（ pUC 8、9、12、13、18、19）具有pBR和M13的许多特性，一般2.7kb. 含有Ampr基因和LacZ基因的一部分。 4. λ噬菌体(λphage) 5. 粘性质粒(cosmid) 6. M13噬菌体 第四节 基因的分离与鉴定 一. 基本步骤 （1）用于基因克隆的DNA材料的选择以及DNA分子的片段化； （2）外源DAN片段与载体分子的体外连接； （3）将人工重组的DNA分子导入它们能够进行正常复制的寄主细胞； （4）重组体分子的转化子克隆的选择或筛选。 二. 重组体分子导入受体细胞的途径 1. 原核细胞和低等真核细胞：转化、转导 2. 高等真核细胞：显微注射、 电穿孔 三. 克隆基因的分离 1. 看家基因（house-keeping gene） 以其组成型表达模式维持细胞的基本代谢活动的基因。 2. 发育调控基因（developmental regulated gene） 以其时空特异性表达