细胞分离和破碎.pptVIP

渗透压冲击法 渗透压冲击(Osmotic shock)是在各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阴性菌。将细胞置于高渗透压的介质(如较高浓度的甘油或蔗糖溶液)中，达到平衡后，将介质突然稀释或将细胞转置于低渗透压的水或缓冲溶液中。在渗透压的作用下，水渗透通过细胞壁和膜进入细胞，使细胞壁和膜膨胀破裂。 冻结-融化法 将细胞急剧冻结后在室温缓慢融化，此冻结—融化操作反复进行多次，使细胞受到破坏。冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，增加其亲水性和通透性。另一方面，由于胞内水结晶使胞内外产生溶液浓度差，在渗透压作用下引起细胞膨胀而破裂。冻结-融化法对于存在于细胞质周围靠近细胞膜的胞内产物释放较为有效。 2.1.2 细胞破碎原理 细胞破碎方法可分成两大类，一是机械法，二是非机械法，或是两者的结合。 机械法（主要有压缩力和剪切力）有珠磨法、高压均质法、超声破碎法、X-press法等；由于消耗的机械能转为热量会使温度上升，大多需冷却以防止生物品受热破坏。 非机械法有酶溶法、化学法、物理法等。 化学破碎利用化学或生化试剂(酶)改变细胞壁或细胞膜结构，增大胞内物质的溶解速率；或者完全溶解细胞壁后，在渗透压作用下使细胞膜破裂而释放胞内物质。 由于细胞之间以及目标产物之间的性质差别很大，