药代谢组学研究中生物样品前处理方法.docVIP

药代谢组学研究中生物样品前处理方法.doc

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广东药学院学报 Journal of Q垃,lg如ng Pharmaceutical College Aug.2010,26(4 中药代谢组学研究中生物样品前处理方法 邹忠杰1,梁生旺1,袁经权2,龚梦鹃1 (1.广东药学院中药学院,广东广州510006;2.中国医学科学院药用植物研究所广西分所, 广西,南宁530023 摘要:总结中药代谢组学研究中生物样品(尿液、血液的前处理方法,主要包括:尿液中加入缓冲液提 供相同的pH值和离子强度,保持代谢物化学位移的恒定。利用有机溶剂沉淀法除去血液中的大分子 物质,增加色谱柱的性能和使用寿命。血液和尿液样品在进行GC-MS分析前要进行衍生化处理。同 时,对尿液和血液的采集与储存方法进行了总结。 关键词:中药;代谢组学;样品前处理 中图分类号:R 284文献标识码:A doi:10.3969/j.issn.1006—8783.2010.04.029 文章编号:1006—8783(201004一0434一04 Pretreatment methods of biological samples in the study of metabonomies of traditional Chinese medicine ZOU Zhong-Jiel,HANG Sheng.Wan91,YUAN Jing.Quan2,GONG Meng—Juanl (1.School of Traditional Chinese Medicine,Guangdong Pharmaceutical College,Guangdong Guangzhou 510006,China;2.Guangxi Station of Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy ofMedical Sciences,Nanning,Guangxi 530023,China Abstract:In order to reduce the chemical shift variation,the pH and the consistency of ionic strength were controlled by adding buffer to urine samples.In analysis of blood,efficient removal of macromolecules such as proteins by organic solvent precipitation before injection into all analytical LC column was important in enhancing the performance and extending column lifetime.Sample derivatization of blood sample and urine sample before GC?MS analysis wag needed.And methods of collection and storage of urine and blood samples were also reviewed. Key words:traditional Chinese medicine;metabonomics;pretreatment 代谢组学(metabonomics是继基因组学、转录 组学和蛋白质组学后新兴的一种组学方法,是系统 生物学的重要组成部分。中药“多组分、多靶点、整 合调节作用”的特点与代谢组学整体性、系统性、综 合性相吻合。因此,以代谢组学为主体的系统生物 学研究方法可能是现代科学中可以概括中医药抽象 整体观思想的重要途径。王广基等对代谢组学技术 收稿日期:2010—06—13 基金项目:广东省教育厅高水平科研项目(自然科学(粤财 教 作者简介:邹忠杰(1980一,男,博士,从事天然活性物质的 发现与评价研究.Email:zouzhongjie@hotmail.corn。 在中医药关键科学问题研究中的应用前景进行了分 析…。作者综述了代谢组学技术在中药整体疗效、 作用机制及安全性等研究中的应用旧J。 代谢组学研究中的分析手段主要包括核磁共振 谱(NMR、气相色谱.质谱(GC.MS和液相色谱.质 谱(LC-MS等各种高通量、高分辨、高灵敏度的谱学 技术∞J。NMR由于其具有很高的重现性、一次实验 中实现对各种化合物的同时测定、信号强度与其摩 尔浓度成正比,可以很容易进行定量分析、借助各种 2D—NMR技术可以在对复杂样品不进行进一步分离 的前提下实现结构鉴定等诸多优点而被广泛应 用M

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