ctc循环肿瘤细胞.pptxVIP

行业背景;循环肿瘤细胞，circulating tumor cell，CTC 1896年在患者外周血中发现与原发肿瘤细胞体积和形态相似的细胞 目前CTCs定义为自发或因诊疗操作脱离实体瘤原发灶或转移灶进入外周血循环的肿瘤细胞 在肿瘤转移灶形成前即可在外周血中检测到循环肿瘤细胞 ;循环肿瘤细胞的特性;CTCs检测的临床可行性;健康状态 癌前病变 恶性肿瘤 肿瘤转移; 如何检测CTCs？ 由于外周血中CTC非常稀少，通常CTC检测会首先利用细胞的物理性质或生物特性等对CTC加以分离富集。 CTCs的富集：如何获取CTCs？ ※从红细胞和白细胞中富集恶性肿瘤细胞 CTCs的鉴定：如何鉴定所获细胞为CTCs？ ※将恶性肿瘤细胞与红细胞、白细胞、正常上皮细胞、造血干细胞等区分开来 ;对于分离富集的CTC可以进行基因型或者表型分析等以计数CTC或者鉴定其分子特性 免疫表型分析： 靶细胞丢失 PCR分析： 高效率，高灵敏度，特异性，操作简单。 假阳性率较高、细胞形态学被破坏、需要更严格的标本保存条件和实验条件 单个CTC分子信息监测（克服白细胞污染） ;循环肿瘤细胞的分离富集;CTCs分离、分型、分析 ;原 理;免疫捕获法——磁珠分选;阳性富集; ;CellsearchTM CTCs鉴定;芯片的表层排布了78 000个包被抗 EpCAM抗体的微位点 血液样本流经芯片时，抗体与肿瘤细胞结合粘附在芯片上 制造相对困难，成本昂贵， 显微位点周围的血流通畅性限制了与抗体覆盖位点接触的CTC数量;原理： 联合上皮细胞标志及肿瘤特异性标志通过免疫磁珠分选特异性肿瘤的CTCs 联合抗MUC1和EpCAM抗体检测乳腺癌和直肠癌 通过RT-PCR扩增肿瘤标志物来鉴定CTCs 特点： 较单一使用EpCAM抗体更特异 不适用于EpCAM和CK阴性或弱化的CTCs PCR鉴定敏感性高，但易造成假阳性;阴性富集;阴性筛选法--Cyttel;基于细胞大小过滤;密度梯度离心;流式细胞术;技术