一09物料处理与培养基制备.pptxVIP

第1页/共81页生物工程设备是生物工程技术和化学工程与设备交叉的学科，主要介绍在生物工程生产过程中常用设备的结构、特点、原理、设计、计算、选型及保养.第2页/共81页生物工程设备曾用名：工业生物技术装备工业生化设备生化设备抗生素生产设备发酵设备第3页/共81页参考书:（1）《生物工程设备》，梁世中 主编 中国轻工业出版社.（2）《发酵设备》高孔荣 编著 中国轻工业出版社. (3)《生物加工过程与设备》，郑裕国等 ，化学工业出版社.第4页/共81页主要内容讲课学时第一章 培养基灭菌的设备 4学时第二章 压缩空气预处理及除菌设备 6学时第三章 生物反应器 14学时第四章 液-固分离设备 6学时第五章 萃取设备6学时第六章 蒸发与结晶设备4学时第七章 生物产品干燥设备6学时复习与机动2学时总计48学时第5页/共81页考核:平时成绩20分.出勤、作业、小考、笔记、课堂表现等。期末闭卷考试 成绩80分.第6页/共81页第一章 培养基灭菌的设备 第一节 培养基的灭菌方法※第二节 培养基实罐灭菌※第三节 培养基连续灭菌第7页/共81页 第一节 培养基的灭菌方法 采用高温蒸气灭菌---湿热灭菌 第8页/共81页 1.工程上无菌标准灭菌对象 耐热杆菌芽孢120℃,20-30分钟 培养基初始污染度 104～108（个/ml）： 2×107个/ml 无菌标准 NS=10-3 即1/1000的失败机率第9页/共81页 2. 对数残留定律微生物死亡速率与任一瞬间残存的活菌数成正比——对数残留定律即第10页/共81页死亡速率常数K（热致死反应速率常数）K是表达微生物耐热性的特征常数 ，单位是min-1，与微生物的种类和灭菌温度有关。K越小，微生物越耐热。第11页/共81页开始灭菌时，t ＝ 0，培养基中的活菌数量为N 0 ；当t ＝ t 时，N ＝ Nt式（1－1）被称为对数残留定律，第12页/共81页理论灭菌时间N 0 一般可以参考培养基中的活微生物：（1～2）×(10 5-107 )个。 Nt ＝ 0.001 个/ 罐。第13页/共81页第14页/共81页第15页/共81页 3.死亡的速度常数K与温度关系,阿累尼乌斯常数A，活化能E第16页/共81页对于某一耐热芽孢杆菌 A=1.34x10３６(1/S) △E = 67930卡/克分子第17页/共81页灭菌温度的选择式中 ΔE为菌体死亡反应的活化能（J/mol），它是菌体死亡反应的特征常数，所以，不同菌其热死亡反应的ΔE不同。 第18页/共81页灭菌时杀死微生物的ΔE大于培养基成分破坏的 ΔE` ，因此，随温度的上升，比死亡速率常数增加倍数要大于培养基成分分解的速率。第19页/共81页4.灭菌的温度和时间对营养成分破坏的影响第20页/共81页灭菌目的：灭菌后的培养基无杂菌,营养成分破坏少。培养基灭菌要解决的问题是：灭菌的温度灭菌的时间第21页/共81页5.影响培养基灭菌的其他因素培养基成分、pH值、培养基中的颗粒、泡沫第22页/共81页第二节 培养基实罐灭菌分批灭菌（实消、实罐灭菌）连续灭菌（连消）空罐灭菌（空消）第23页/共81页第24页/共81页 1、分批灭菌（实消、实罐灭菌） 将配制好的培养基放在发酵罐、加压灭菌锅或其它容器中，通入水蒸汽将培养基和所用设备一起灭菌的操作过程。第25页/共81页四路进汽：直接蒸汽从进气口、取样和排料口进入罐内直接加热，夹套进气。* 四路出汽：直接蒸汽从排气、接种、进料和消泡剂管排气。第26页/共81页 2、分批灭菌的过程包括三个阶段 升温（预热）阶段： 通过夹套或蛇管间接加热75-90℃。大罐也可以直接蒸气加热。 然后再导入蒸汽升温到120－130℃。第27页/共81页保温阶段：灭菌的重要阶段。习惯上， 50立方米以下的,保温时间看作是灭菌时间。从各路通入蒸汽（进气口、排料口、取样口），温度升到120－130℃，保温30min 保温中，应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽，不留死角，灭菌彻底。第28页/共81页降温阶段：依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷水降温，防止罐体负压变形。 第29页/共81页3、分批灭菌的注意事项1）各路蒸汽进口要畅通，防止短路逆流；罐内液体翻动要剧烈，使物料达到均一的灭菌温度。2）排气量不宜过大，以节约蒸汽。第30页/共81页3）灭菌将要结束时，应立即引入无菌空气以保持罐压，然后开夹套或蛇管冷却，以避免罐压迅速下降产生负压而吸入外界空气，或引起发酵罐破坏。4）在引入无菌空气前，罐内压力必须低于过滤器压力，否则培养基将倒流入过滤器。第31页/共81页4、培养基实罐灭菌的质量优劣判别的标准